جسم مضاد أحادي النسيلة أرنب مضاد للفوسفو-راف1-سيرين 259 للويسترن بلوت والإليزا - P04049

المواصفات والمعايير الأساسية للمنتج

الخلفية البيولوجية: وظيفة RAF1 وتوطينه

• RAF1 (المعروف أيضًا باسم c-RAF أو Raf-1) هو كيناز سيرين/ثريونين بروتيني يعمل كحلقة وصل تنظيمية حرجة بين بروتينات Ras المرتبطة بالغشاء والشلال الإشاري MAPK/ERK المصب، مما يتحكم في قرارات مصير الخلية مثل التكاثر، والتمايز، والاستماتة، والبقاء.
• عند التنشيط، يقوم RAF1 بفسفرة وتنشيط الكينازات ثنائية الخصوصية MEK1/2، والتي بدورها تقوم بفسفرة ERK1/2، مما ينشر الإشارات التي تنظم التعبير الجيني والاستجابات الخلوية.
• بروتين RAF1 المفسفر (على سبيل المثال عند السيرين-338 والسيرين-339) يفسفر مباشرة البروتين المؤيد للاستماتة BAD، مما يعزز بقاء الخلية. كما يفسفر أيضًا أدينيليل سيكلاز (ADCY2/5/6) وينظم الفوسفاتاز PPP1R12A.
• يؤثر RAF1 على مسارات إشارات متعددة: يمكنه تعزيز تنشيط NF-κB بينما يثبط عوامل تأثير مثل ROCK2 (الحركة)، وASK1/MST2 (الاستماتة)، وRB1 (التكاثر/تكوين الأوعية).
• تحت محفزات الاستماتة، يمكن أن ينتقل RAF1 إلى الميتوكوندريا، حيث يرتبط بـ BCL2 ويزيح BAD، مما يوفر آلية إضافية مضادة للاستماتة.
• يلعب RAF1 دورًا في هجرة الخلايا من خلال تنظيم إشارات Rho وهو مطلوب للشفاء الطبيعي للجروح. كما يساهم في التحول الورمي من خلال قمع التعبير عن بروتينات الوصلات المحكمة مثل الأوكلودين (OCLN).
• يتوطن البروتين بشكل أساسي في السيتوبلازم وعند غشاء الخلية، ولكن يمكن أيضًا العثور عليه في الميتوكوندريا والنواة تحت ظروف معينة.
• يتم التعبير عن RAF1 في أنسجة مختلفة؛ في العضلات الهيكلية، يكون النمط الإسوي 1 أكثر وفرة من النمط الإسوي 2.

إرشادات تجريبية ونصائح تقنية

• المستضد المناعي هو ببتيد صناعي مفسفر مركز حول السيرين 259 من بروتين RAF1 البشري (P04049). من المتوقع أن يتعرف الجسم المضاد الناتج بشكل محدد على RAF1 عند فسفرته عند السيرين 259؛ يجب تأكيد النوعية من خلال مقارنة الإشارات بين العينات المعالجة بالفوسفاتاز وغير المعالجة.
• لتقنية الويسترن بلوت (WB)، استخدم مستخلص بروتين من خلايا بشرية أو خلايا جرذ معروفة بالتعبير عن RAF1. يجب ملاحظة حزمة عند حوالي 73 كيلو دالتون في ظل ظروف مختزلة. قم دائمًا بتضمين ضوابط إيجابية وسلبية مناسبة (مثل مستخلصات الخلايا المحرومة من المصل مقابل المستخلصات المحفزة بعامل النمو).
• لتقنية الإليزا، قم بمعايرة الجسم المضاد ضد المستضد المناعي (الببتيد المفسفر) وتحقق من صحته في وسط بيولوجي ذي صلة لضمان الكشف الخطي. فكر في إقرانه بجسم مضاد مضاد لـ RAF1 الكلي لتطبيع مستويات الفسفرة.
• نظرًا لأن الجسم المضاد يتم توريده في أكياس ثلج، تجنب دورات التجميد والذوبان المتكررة وقم بالتخزين في الظروف الموصى بها للحفاظ على الفعالية.

كاميل بيو: جسر التوريد الشامل الخاص بك

تعمل كاميل بيو كجسر توريد شامل للمواد الخام للتشخيص المخبري (IVD)، حيث تقدم إمدادات موثوقة من الأجسام المضادة المعتمدة مثل هذا الجسم المضاد الخاص بالفسفرة لـ RAF1، إلى جانب الكواشف التكميلية، والطلبات بالجملة، وخدمات التطوير المخصصة لدعم سير عمل التشخيص والبحث الخاص بك. سواء كنت تحتاج إلى أزواج متطابقة من الأجسام المضادة، أو إنزيمات مساعدة، أو أجسام مضادة نوعية لأهداف نادرة، فإن منصتنا تتيح تبسيط عملية الشراء من الاكتشاف إلى التطبيق السريري.