مضاد أحادي النسيلة أرنب مضاد لـ PAK1/2/3 المفسفر (S144/S141/S139) للتحليل المناعي اللطخي (WB) و الاختبار الإنزيمي المناعي (ELISA) - Q13153 / Q13177 / O75914

المواصفات والمعلمات الأساسية للمنتج

الخلفية البيولوجية: وظيفة PAK1 وموقعه الخلوي

• PAK1 (كيناز منشط بـ p21 النوع 1، ألفا-PAK) هو بروتين كيناز سيرين/ثريونين، ينتمي إلى عائلة PAK جنبا إلى جنب مع PAK2 و PAK3. يتعرف هذا الضاد على الشكل المفسفر لبقايا السيرين المحفوظة المكافئة لـ S144 في PAK1 و S141 في PAK2 و S139 في PAK3، وهي بقايا ضرورية لتنشيط الكيناز.
• يتم تنشيطه بواسطة البروتينات G التابعة لـ Rho CDC42 و RAC1، ويربط PAK1 الإشارات خارج الخلية بالمسارات داخل الخلية التي تتحكم في ديناميكيات الهيكل الخلوي والالتصاق الخلوي والهجرة.
  المراجع ذات الصلة: PMID:8805275 PMID:9528787
• يعيد PAK1 تنظيم الهيكل الخلوي الأكتيني عن طريق تعزيز تكوين الألياف الإجهادية والالتصاقات البؤرية، وبالتالي ينظم شكل الخلية وحركتها.
  المراجع ذات الصلة: PMID:9032240 PMID:9395435
• ينظم الكيناز عملية الاستماتة عن طريق فسفرة RAF1، الذي بدوره يفسفر BAD ويعزى احتجازه في الميتوكوندريا.
  المراجع ذات الصلة: PMID:11733498
• داخل الخلية، يوجد PAK1 في السيتوبلازم، وصلات الخلايا، الصفيحات اللاميلية، أغشية التجاعيد، الأرجل الغازية، النواة، والجسم المركزي، وهو ما يتوافق مع أدواره المتعددة في الإشارات وبنية الخلية.
• تشمل التعديلات بعد الترجمة الفسفرة الذاتية في العديد من بقايا السيرين/الثريونين (بما في ذلك S144) والأسيتلة، التي تعدل النشاط والموقع داخل الخلية.
• سريرياً، يتم التعبير الزائد عن PAK1 في سرطان المعدة، مما يعزز الغزو والهجرة، وقد تم ربطه باضطرابات عصبية.
  المراجع ذات الصلة: PMID:25766321

إرشادات تجريبية ونصائح تقنية

• بالنسبة للتحليل المناعي اللطخي، استخدم خلطات مثبطة للبروتياز والفوسفاتاز أثناء تحلل الخلايا/الأنسجة للحفاظ على حالة الفسفرة. النطاق المتوقع لـ PAK1 يبلغ حوالي 65 كيلو دالتون، ولكن قد تحدث اختلافات طفيفة في الحجم بين الأنواع أو بسبب التعديلات بعد الترجمة.
• يمكن تأكيد خصوصية الإشارة الفسفورية عن طريق معالجة العينات بـ λ-فوسفاتاز أو عن طريق فحوصات التنافس الببتيدي باستخدام ببتيد المستضد المناعي غير المفسفر.
• في الاختبار الإنزيمي المناعي، استخدم ببتيداً مفسفراً مطابقاً للمستضد المناعي كمستضد مطلي، وقم بتضمين الضوابط المناسبة (ببتيد غير مفسفر، عينة فارغة) لتقييم خصوصية الضاد.
• نظراً لأن الضاد يتعرف على موقع فسفرة محفوظ مشترك بين PAK1/2/3، يُنصح بالتحقق من هوية النموذج الإيزي في نظامك باستخدام أضداد PAK الكلية النوعية للنماذج الإيزية أو التثبيط بالـ siRNA.

CamelBio: جسرك الشامل للمصادر

تعمل CamelBio على تبسيط شراء المواد الخام للتشخيص في المختبر من خلال محفظة شاملة من الأضداد النوعية المفسفرة التي تم التحقق من صلاحيتها، بما في ذلك هذا الضاد أحادي النسيلة المضاد لـ PAK1/2/3 (S144/S141/S139)، المصمم خصيصاً لأبحاث الإشارات داخل الخلية. بالإضافة إلى الكواشف المفردة، نقدم أزواج الأضداد المطابقة، والكواشف المساعدة بكميات كبيرة، وخدمات توفير مخصصة للأهداف الصعبة - نربط مصنعي التشخيص بالمكونات الحيوية من مرحلة الاكتشاف حتى التسويق التجاري.