جسم مضاد وحيد النسيلة أرنب ضد NRF2 المفسفر عند السيرين 40 للتلطيخ الغربي، التصوير المناعي/المناعي الخلوي، المقايسة المناعية الإنزيمية - Q16236

المواصفات والمعاملات الأساسية للمنتج

الخلفية البيولوجية: وظيفة NRF2 وموقعه الخلوي

• هوية البروتين: NRF2 (عامل نواهي كريات الدم الحمراء 2 المرتبط بالعامل 2)، المشفر بواسطة جين NFE2L2، هو عامل نسخي يحتوي على zipper ليوسين أساسي (bZIP) ينتمي إلى عائلة cap 'n' collar (CNC).
• تنظيم الاستجابة المضادة للأكسدة: يرتبط NRF2 بعناصر الاستجابة المضادة للأكسدة (ARE) في محفزات الجينات الواقية الخلوية، بما في ذلك إنزيمات إزالة السموم من المرحلة 2، لتعزيز تعبيرها وتحييد الإلكتروفيلات التفاعلية. المراجع ذات الصلة: PMID:11035812, PMID:19489739, PMID:29018201
• التحلل بوساطة KEAP1: في الظروف الأساسية، يتم استهداف NRF2 لليوبيكيتين والتحلل في البروتيسوم بواسطة مركب BCR(KEAP1)، مما يحافظ على مستوياته المنخفضة في السيتوبلازم. المراجع ذات الصلة: PMID:11035812, PMID:15601839, PMID:29018201
• التنشيط بواسطة الإجهاد التأكسدي: عند حدوث الإجهاد التأكسدي، تثبط مستقلبات الإلكتروفيل نشاط KEAP1، مما يسمح لـ NRF2 بالتراكم والانتقال إلى النواة، حيث يتشكل ديمير غير متماثل مع بروتينات Maf الصغيرة وينشط النسخ الجيني. المراجع ذات الصلة: PMID:19489739, PMID:29590092
• التنشيط بواسطة الالتهام الذاتي: يحفز الالتهام الذاتي الانتقائي أيضًا تنشيط NRF2 عبر تعطيل مركب KEAP1 بوساطة SQSTM1/p62، مما يربط الالتهام الذاتي بتوازن الأكسدة والاختزال. المراجع ذات الصلة: PMID:20452972
• المناعة الفطرية والدفاع ضد الفيروسات: يثبط NRF2 الاستشعار بالحمض النووي المضاد للفيروسات في السيتوبلازم عن طريق كبح تعبير STING1، ويحد من إطلاق السيتوكينات المسببة للالتهاب أثناء العدوى الفيروسية، بما في ذلك عدوى SARS-CoV-2، عبر تثبيط IRF3. كما يثبط تكاثر العديد من الفيروسات بطريقة مستقلة عن الإنترفيرون. المراجع ذات الصلة: PMID:30158636, PMID:33009401
• الموضع تحت الخلوي والتعديلات ما بعد الترجمة: يتنقل NRF2 بين السيتوبلازم والنواة. ويخضع لعدة تعديلات ما بعد الترجمة، تشمل الفسفرة، الأستلة، واليوبيكيتنة، التي تتحكم بإحكام في ثباته ونشاطه النسخي.
• التوزيع الأنسجي: يتم التعبير عن NRF2 على نطاق واسع، مع أعلى المستويات المكتشفة في عضلات البالغين، الكلى، الرئة، الكبد، وعضلات الجنين.

إرشادات تجريبية ونصائح تقنية

• المستضد المناعي هو ببتيد فسفوري اصطناعي يتوافق مع البقايا المحيطة بالسيرين 40 من بروتين NRF2 البشري. للكشف المحدد عن البروتين المفسفر، تأكد من أن الحاتمة المستضدة مكشوفة في نظامك التجريبي؛ ضع في اعتبارك معالجة العينات بمثبطات الفوسفاتاز للحفاظ على الإشارة الفوسفورية.
• عند إجراء التلطيخ الغربي (Western blot)، يكون الوزن الجزيئي المتوقع حوالي 68 كيلو دالتون؛ تحقق من خصوصية النطاق باستخدام الضوابط الإيجابية والسالبة (مثل الخلايا المعرضة للإجهاد التأكسدي مقابل الخلايا غير المعالجة أو نماذج التثبيط الوراثي لـ KEAP1).
• بالنسبة للتصوير المناعي/المناعي الخلوي (IF/ICC)، قم بتحسين ظروف التثبيت والنفاذية للحفاظ على سلامة الحاتمة الفوسفورية؛ استخدم التثبيت بتركيز 4% من PFA والنفاذية بمنظف خفيف كنقطة بداية.
• هذا الجسم المضاد مناسب للتلطيخ الغربي، التصوير المناعي/المناعي الخلوي، والمقايسة المناعية الإنزيمية. يُنصح بمعايرة تركيز الجسم المضاد لكل تطبيق والتحقق من صحته في أنواع العينات البشرية ذات الصلة.

CamelBio: جسرك الشامل للمصادر

CamelBio هي منصة مصادر شاملة مخصصة لتزويد مصنعي التشخيص، والمختبرات، والمعاهد البحثية بمواد خام عالية الجودة للتشخيص في المختبر ودعم فني. تشمل محفظتنا أزواج أجسام مضادة مصدقة، وأجسام مضادة وحيدة النسيلة وعديدة النسيلة محسنة مثل هذا الكاشف ضد NRF2 المفسفر عند S40، ومواد خام مساعدة بكميات كبيرة، ومصادر مخصصة للمواد الخام ذات الأهداف النادرة. نحن نبسط سير عملك من الفكرة إلى المرحلة السريرية، ونضمن وصولًا موثوقًا إلى الكواشف الأساسية لأبحاث الإجهاد التأكسدي والحماية الخلوية.