جسم مضاد أحادي النسيلة من الأرانب ضد NF-kB p65/RelA المفسفر (Ser468) لتطبيقات WB وIP وELISA - Q04206

المواصفات والمعايير الأساسية للمنتج

الخلفية البيولوجية: وظيفة وتوطين NF-kB p65/RelA

• عامل النسخ p65 (RelA) هو الوحدة الفرعية p65 لمعقد عامل النسخ NF-kB، وهو عامل متعدد التأثيرات موجود في جميع أنواع الخلايا تقريبًا، ويعمل كنقطة نهاية لمسارات نقل الإشارة التي تبدأ بمحفزات متنوعة تتعلق بالالتهاب والمناعة والتمايز ونمو الخلايا وتكون الأورام وموت الخلايا المبرمج.
• يعمل NF-kB كمتماثل أو مغاير لبروتينات تحتوي على نطاق Rel. الشكل الأكثر وفرة هو المغاير RELA-NFKB1 (p65-p50). ترتبط هذه المتغايرات بمواقع DNA من نوع kappa-B بألفة متميزة، حيث تعمل معقدات RELA-NFKB1 وRELA-REL كمنشطات للنسخ.
• يتم تنظيم نشاط NF-kB من خلال آليات متعددة بما في ذلك التعديلات بعد الترجمة، وتجزئة الخلايا الفرعية، والتفاعلات مع العوامل المساعدة أو الكابحات المشتركة. يتم الاحتفاظ بـ NF-kB غير النشط في السيتوبلازم بواسطة بروتينات I-kB المثبطة؛ عند حدوث الفسفرة بوساطة IKK وتحلل I-kB، يتم إطلاق معقد NF-kB وينتقل إلى النواة.
• يمتلك RELA ألفة ارتباط ضعيفة بـ DNA ولكنها تساهم في قدرة معقد NF-kB على الارتباط بـ DNA. كما أنه يعدل إمكانية الوصول إلى الكروماتين في المحفزات المستهدفة، مما يؤثر بشكل غير مباشر على التعبير الجيني.
• يعتبر RELA ضروريًا للتعبير عن جينات السيتوكين في الخلايا التائية، ويلعب دورًا محوريًا في الاستجابات المناعية التكيفية. مراجع ذات صلة: PMID:15790681
• أثناء الإصابة بفيروس SARS-CoV-2، يعمل RELA كعامل نسخ رئيسي ينظم استجابة الإنترفيرون، مما يؤكد دوره في المناعة الفطرية المضادة للفيروسات. مراجع ذات صلة: PMID:33440148
• على المستوى الخلوي، يتنقل RELA بين السيتوبلازم والنواة. وهو يخضع لتعديلات واسعة النطاق بعد الترجمة، بما في ذلك الأستلة، والمثيلة، والفسفرة (على سبيل المثال، عند Ser468 كما يستهدف هذا الجسم المضاد)، وS-نيتروزيلة، والاقتران الشبيه باليوبيكويتين، والتي تعدل نشاطه واستقراره وتفاعلاته.

التوجيه التجريبي والنصائح التقنية

• بالنسبة لتقنية لطخة ويسترن (WB)، قم بتحضير المحللات باستخدام محلول RIPA المضاف إليه مثبطات البروتياز والفوسفاتاز للحفاظ على إشارة الفسفرة عند Ser468. قم بإجراء SDS-PAGE والنقل، ثم افحص باستخدام الجسم المضاد بتركيز مخفف يتم تحديده تجريبيًا.
• في تجارب الترسيب المناعي (IP)، تأكد من أن مستوى تعبير البروتين المستهدف كافٍ في محلول الخلية أو الأنسجة الخاص بك. قد يسهل أصل الجسم المضاد (الأرنب) وطبيعته أحادية النسيلة الالتقاط النظيف باستخدام كواشف ثانوية مطابقة للنوع.
• بالنسبة للكشف القائم على ELISA، فكر في استخدام الجسم المضاد ككاشف التقاط أو كشف، مع التحقق من الخطية والنوعية في نظام الفحص الخاص بك باستخدام ضوابط مناسبة خاصة بالفسفرة.
• نظرًا لأن الجسم المضاد يتفاعل بشكل متصالب مع البشر والفئران والجرذان، فيمكن استخدامه للدراسات المقارنة عبر هذه الأنواع. ومع ذلك، تحقق دائمًا من الأداء من خلال تضمين ضوابط إيجابية وسلبية لكل نوع وحالة علاج.
• قم بتحسين تركيز الجسم المضاد لكل تطبيق ونوع عينة، حيث قد تختلف التخفيفات الموصى بها باختلاف الظروف التجريبية وطرق الكشف.

CamelBio: جسرك الشامل للمصادر

تعد CamelBio شريكك المتكامل للمواد الخام للتشخيص المختبري (IVD)، حيث توفر لمصنعي التشخيص والمؤسسات البحثية محفظة شاملة بدءًا من الأجسام المضادة للتحقق من المرشحين الرئيسيين وصولاً إلى الكواشف المساعدة بالجملة. في مجال أبحاث الالتهاب والمناعة، نقوم بتوفير أجسام مضادة محسنة، بما في ذلك الأجسام المضادة أحادية النسيلة الخاصة بالفسفرة مثل منتج anti-RelA (pS468) هذا، لتسريع تطوير الفحوصات. تضمن خبرتنا في سلسلة التوريد جودة متسقة وتسليمًا في الوقت المحدد للكواشف الحيوية النادرة لدعم برامجك السريرية وبرامج البحث والتطوير.