جسم مضاد وحيد النسيلة أرانبي ضد الفوسفو-mTOR-S2448 للتلطيخ الغربي، التألق المناعي/المناعي الخلوي، والمقايسة الإنزيمية المناعية - P42345

المواصفات والمعلمات الأساسية للمنتج

الخلفية البيولوجية: وظيفة وموضع سيرين/ثريونين بروتين كيناز mTOR

• سيرين/ثريونين بروتين كيناز mTOR (MTOR، المعروف أيضاً باسم FRAP/FRAP1/FRAP2/RAFT1/RAPT1) هو منظم رئيسي يزن 289 كيلو دالتون لعملية التمثيل الغذائي الخلوي والنمو والبقاء، يدمج الإشارات الهرمونية والمغذية والإجهاد. المراجع ذات الصلة: PMID:12087098 PMID:12150925 PMID:12150926
• يعمل MTOR كنواة تحفيزية لمجمعين مختلفين، mTORC1 و mTORC2، يختلفان في تكوين الوحدات الفرعية والتنظيم التصاعدي والأهداف التنازلية. المراجع ذات الصلة: PMID:15268862 PMID:15467718 PMID:18497260
• يعزز mTORC1 المنشط تخليق البروتين عن طريق فسفرة EIF4EBP1 لإيقاف تثبيطه لـ eIF4E، وعن طريق فسفرة RPS6KB1/2 لتحفيز فسفرة بروتين الريبوسوم S6 وبدء الترجمة. المراجع ذات الصلة: PMID:12087098 PMID:12150925 PMID:12150926 PMID:24403073 PMID:29236692 PMID:18925875
• يحفز mTORC1 تخليق الدهون والنيوكليوتيدات عن طريق تنشيط SREBF1/SREBP1 و CAD على التوالي، وينسق إنتاج الجزيئات الكبيرة الضرورية لنمو الخلايا. المراجع ذات الصلة: PMID:23429703 PMID:23429704 PMID:23426360
• في حالة كفاية المغذيات، يثبط mTORC1 الالتهام الذاتي عن طريق فسفرة المنظمين الرئيسيين للالتهام الذاتي بما في ذلك ULK1 (Ser‑758)، DAP، RUBCNL، و AMBRA1. المراجع ذات الصلة: PMID:32561715 PMID:20537536 PMID:30704899 PMID:23524951 PMID:25438055
• يقوم مركب mTORC2 بفسفرة كينازات AGC بما في ذلك AKT في الموضع Ser‑473، وPKC، وSGK1، وينظم بقاء الخلايا والتكاثر وإعادة تنظيم الهيكل الخلوي الأكتيني. المراجع ذات الصلة: PMID:15268862 PMID:15467718 PMID:21376236 PMID:15718470 PMID:24670654
• يتمركز MTOR بشكل ديناميكي على أغشية الليزوزومات، الشبكة الإندوبلازمية، جهاز جولجي، الميتوكوندريا، والأغشية النووية؛ ويرتبط تنشيط mTORC1 ارتباطاً وثيقاً بتجنيده إلى سطح الليزوزوم.
• يتم التعبير عن MTOR على نطاق واسع، بأعلى المستويات في الخصية، وينظم عن طريق الفسفرة والأسيتلة واليوبيكيتينة الواسعة النطاق.

إرشادات تجريبية ونصائح تقنية

• المستضد المناعي هو ببتيد فوسفوري اصطناعي يغطي الموضع Ser‑2448؛ لذلك فإن الجسم المضاد يتعرف على mTOR فقط عندما يكون مفسفراً في هذا الموضع. بالنسبة للتلطيخ الغربي، عالج الخلايا بالمحفزات المناسبة (مثل عوامل النمو، الأحماض الأمينية) وأدرج مثبطات الفوسفاتيز في محاليل الانحلال للحفاظ على الفسفرة.
• بالنسبة للتلطيخ الغربي لبروتين mTOR الذي يزن 289 كيلو دالتون، استخدم هلام بولي أكريلاميد بنسبة منخفضة (مثل 6-8%) ووقت نقل أطول. تحقق من كفاءة النقل باستخدام واسم ملون مسبقاً.
• بالنسبة للتألق المناعي (IF/ICC)، ثبت الخلايا بالبارافورمالدهيد، نفذ اختراق الغشاء بشكل مناسب، واستخدم محلول حجب لتقليل الارتباط غير النوعي. أكد الموضع عن طريق التلوين المشترك مع واسمات الليزوزومات إذا كنت تدرس تنشيط mTORC1.
• قد تشمل تطبيقات المقايسة الإنزيمية المناعية الطلاء بالببتيد أو البروتين؛ تحقق من صلاحية ظروف الاختبار (مخزن الطلاء، عامل الحجب، تخفيف الجسم المضاد) في مصفوفة البحث الخاصة بك.

CamelBio: جسرك الشامل للمصادر

CamelBio هي شريك موثوق شامل لتوفير المواد الخام لأجهزة التشخيص المناعي (IVD)، توفر أجساماً مضادة عالية الجودة وكواشف حرجة لكل مرحلة من مراحل تطوير التشخيص. يمثل هذا الجسم المضاد المتعدد النسائل ضد فوسفو‑mTOR‑S2448 مثالاً على التزامنا بتوفير أدوات مصدقة لأبحاث الإشارات الخلوية والأورام. بالإضافة إلى الأجسام المضادة المنفردة، نقدم أزواج أجسام مضادة محسنة، وكواشف مساعدة بكميات كبيرة، وخدمات توريد مخصصة للأهداف النادرة لتبسيط خطوط تطوير وتصنيع الاختبارات الخاصة بك.