جسم مضاد أحادي النسيلة مضاد للفوسفو-eIF2α-S51 لـ WB، ELISA - P05198

مواصفات ومعلمات المنتج الأساسية

الخلفية البيولوجية: وظيفة eIF2α وتوطينه

• عامل بدء الترجمة حقيقية النواة 2 الوحدة الفرعية 1 (eIF2α) هو مكون أساسي لمركب eIF2 ثلاثي الوحدات، المعروف أيضًا باسم eIF-2-alpha، أو eIF-2A، أو eIF2-alpha. بالاشتراك مع eIF2β و eIF2γ، يقوم بتنظيم الخطوات الأولى لتخليق البروتين المعتمد على الغطاء (cap). مراجع ذات صلة: PMID:16289705
• يشكل مركبًا ثلاثيًا مع GTP و methionyl-tRNA البادئ، والذي يرتبط بعد ذلك بالوحدة الفرعية الريبوسومية 40S، مما يسهل تجنيد mRNA لتشكيل مركب ما قبل البدء 43S. يسمح تحلل GTP اللاحق وإطلاق eIF2-GDP بتكوين مركب 80S. مراجع ذات صلة: PMID:16289705
• يؤدي الفسفرة على سيرين 51 (S51) بواسطة كينازات المنشطة بالإجهاد (HRI، PKR، PERK، GCN2) إلى تحويل eIF2α إلى مثبط عام للترجمة، وهو حدث مركزي في استجابة الإجهاد المتكاملة (ISR). يخفف هذا من تخليق البروتين العام مع زيادة تنظيم mRNAs انتقائية مثل ATF4 و QRICH1، مما يمكن الخلية من التكيف مع الإجهاد. مراجع ذات صلة: PMID:19131336 PMID:33384352
• بعد التحكم في الترجمة، يعزز eIF2α المفسفر البلعمة الذاتية للميتوكوندريا المستقلة عن PRKN عن طريق الانتقال إلى الغشاء الخارجي للميتوكوندريا عند تلف الميتوكوندريا، مما يوفر رابطًا مباشرًا بين إعادة برمجة الترجمة ومراقبة جودة العضيات. مراجع ذات صلة: PMID:38340717
• يتواجد eIF2α بشكل أساسي في السيتوبلازم ويمكن أن يتركز في حبيبات الإجهاد تحت الظروف المعاكسة. كما يتوضع على سطح الميتوكوندريا بعد الفسفرة الناتجة عن الإجهاد وتم اكتشافه في العصارة الخلوية.
• يخضع هذا البروتين لتعديلات ما بعد الترجمة متعددة، بما في ذلك الفسفرة والأسيلة، والتي تعمل على ضبط نشاطه، وتوجيهه تحت الخلوي، وتفاعلاته بدقة.
• كبروتين محفوظ للغاية، يتم التعبير عن eIF2α في أنسجة الإنسان والفأر والجرذ، مما يؤكد دوره الأساسي في التحكم في الترجمة وإدارة الإجهاد الخلوي.

إرشادات تجريبية ونصائح تقنية

• المستضد المناعي هو ببتيد فسفوري اصطناعي يغطي S51 من eIF2α البشري (NP_004085.1)؛ لذلك تم تصميم الجسم المضاد للتعرف على الشكل المفسفر. قد لا يتم اكتشاف eIF2α غير المفسفر.
• لعملية النشاف الغربي (WB)، قم بتضمين مثبطات الفوسفاتيز في مخازن التحلل والحضانة للحفاظ على إشارة فسفرة S51. تحقق من خصوصية الجسم المضاد عن طريق معالجة العينات بـ λ‑phosphatase أو إنزيم فوسفاتيز أمعاء العجل قبل التحليل.
• نظرًا لأن فسفرة eIF2α غالبًا ما تكون سريعة وعابرة تحت ظروف الإجهاد، قم بتحسين توقيت تحضير العينة وبروتوكولات تحريض الإجهاد (مثل تجويع المصل، أو إجهاد الشبكة الإندوبلازمية، أو حرمان الأحماض الأمينية) في النظام الخلوي أو النسيجي ذي الصلة.
• لتطبيقات ELISA، ضع في اعتبارك استخدام زوج التقاط/كشف يميز بين إجمالي eIF2α والفوسفو‑eIF2α إذا كان مطلوبًا قياس كلا الشكلين في وقت واحد؛ تحقق من صحة الاختبار باستخدام ضوابط إيجابية وسلبية مناسبة.

كاميل بيو: جسر التوريد الشامل الخاص بك

كمزود مخصص للمواد الخام للتشخيص المخبري (IVD)، تدعم كاميل بيو مصنعي التشخيص والمختبرات البحثية بمجموعة شاملة تشمل أزواج الأجسام المضادة المصدق عليها، والأجسام المضادة أحادية النسيلة ومتعددة النسائل المحسنة، والكواشف المساعدة السائبة، وتوريد الأهداف النادرة المخصصة. يمكّن هذا الجسم المضاد Phospho‑eIF2α‑S51 من إجراء دراسات حول تنظيم الترجمة واستجابة الإجهاد المتكاملة، وتضمن كاميل بيو سلسلة توريد موثوقة لتسريع تطوير اختبارك من المفهوم إلى العيادة.