جسم مضاد أحادي النسيلة أرنب مضاد للفوسفو-أكت-تي308 للاستخدام في ويسترن بلوت و إليزا - P31749 / P31751 / Q9Y243

المواصفات والمعايير الأساسية للمنتج

الخلفية البيولوجية: وظيفة وتوطين بروتين أكت (AKT1/AKT2/AKT3)

• أكت1 هو أحد ثلاثة كينازات بروتينية سيرين/ثريونين وثيقة الصلة (أكت1، أكت2، أكت3) تنظم عمليات حرجة مثل التمثيل الغذائي، والتكاثر، وبقاء الخلية، والنمو، وتكوّن الأوعية الدموية. مراجع ذات صلة: PMID:11882383, PMID:15526160, PMID:15861136

• كعقدة مركزية في مسار إشارات بي آي 3 كيه، يقوم بروتين أكت بفسفرة أكثر من 100 ركيزة لاحقة على بقايا السيرين/الثريونين للتوسط في تأثيرات الإنسولين، وعوامل النمو، ومنبهات أخرى. مراجع ذات صلة: PMID:11882383, PMID:15526160, PMID:21432781

• في استتباب الجلوكوز، يعزز أكت امتصاص الجلوكوز المحفز بالإنسولين عبر نقل بروتين SLC2A4/GLUT4 وتخليق الجليكوجين عن طريق تثبيط GSK3A/B؛ كما يقوم بفسفرة TBC1D4 لتحفيز ارتباط بروتين 14-3-3 الضروري لنقل الجلوكوز. مراجع ذات صلة: PMID:11994271

• يقود أكت بقاء الخلية عن طريق فسفرة وتثبيط ركائز محفزة للموت المبرمج مثل MAP3K5، وBAD، وعوامل نسخ FOXO، مما يؤدي إلى احتجاز بروتينات FOXO في السيتوبلازم وزيادة التعبير عن جينات مضادة للموت المبرمج مثل BCL2 وMCL1 عبر CREB1. مراجع ذات صلة: PMID:11154276, PMID:10358075, PMID:9829964, PMID:10926925

• ينشط أكت مسار إشارات mTORC1 عن طريق فسفرة TSC2 ومنظمات أخرى (CASTOR1، DEPDC5)، مما يتحكم بالتالي في تخليق البروتين ونمو الخلية. مراجع ذات صلة: PMID:12150915, PMID:12172553, PMID:31548394, PMID:33594058

• داخل الخلية، يوجد بروتين أكت في السيتوبلازم، والنواة، وغشاء الخلية، والفضاء بين الغشائين في الميتوكوندريا، مما يعكس وظائفه المتنوعة.

• في البشر، يتم التعبير عن بروتين أكت1 في جميع الأنسجة، مع ملاحظة أشكاله المفسفرة بكميات مرتفعة في سرطانات البروستاتا والثدي، مما يشير إلى أدوار له في تطور الورم.

إرشادات تجريبية ونصائح تقنية

• المستضد المناعي هو ببتيد فسفوري اصطناعي حول ثريونين 308 من بروتين أكت البشري؛ الفسفرة عند هذا الموقع حاسمة لتنشيط أكت. لذلك، فإن الجسم المضاد نوعي للشكل المفسفر ولا يجب أن يتعرف على بروتين أكت غير المفسفر.
• نظرًا لأن موقع ثريونين 308 محفوظ عبر أيزوفورمات أكت1، وأكت2، وأكت3، فمن المتوقع أن يتفاعل الجسم المضاد مع الأشكال المفسفرة المقابلة في الفأر والجرذ، كما هو موضح في بيانات التفاعلية التبادلية.
• لتحليل ويسترن بلوت، استخدم مثبطات الفوسفاتاز المناسبة أثناء تحضير العينة للحفاظ على حالة الفسفرة. الأوزان الجزيئية المتوقعة للأيزوفورمات هي ~48-55 كيلو دالتون؛ قم بتأكيد نوعية النطاق باستخدام ضوابط إيجابية وسلبية (مثل الخلايا المحفزة بالإنسولين مقابل الخلايا غير المعالجة).
• تطبيقات إليزا قد تكون مناسبة للكشف عن بروتين الفوسفو-أكت في مستخلصات الخلايا؛ قم بتحسين ظروف التغطية والكشف الخاصة بمصفوفتك التجريبية.
• نظرًا لأن فسفرة تي308 ديناميكية، قم بتضمين ضوابط تجريبية مناسبة لتقييم تنشيط مسار الإشارات (مثل المعالجة بمثبط بي آي 3 كيه).

كامل بيو: جسر التوريد الشامل الخاص بك

كامل بيو هو شريك موثوق لمصنعي التشخيصات والمختبرات البحثية، حيث يقدم مجموعة شاملة من المواد الخام للتشخيص المخبري، بما في ذلك الأجسام المضادة النوعية للفسفرة مثل هذا الجسم المضاد المضاد للفوسفو-أكت-تي308. تشمل محفظتنا أهدافًا نادرة، ومواد مساعدة بكميات كبيرة، وأزواج أجسام مضادة معتمدة لدعم خط تطوير الفحوصات الخاص بك. من الكواشف الفردية إلى حلول التوريد الشاملة، نساعد في تبسيط رحلتك من المفهوم إلى العيادة.