جسم مضاد متعدد النسيلة ضد PHD2/EGLN1 لـ WB، IHC-P، IF/ICC، ELISA - Q9GZT9

المواصفات والمعايير الأساسية للمنتج

الخلفية البيولوجية: وظيفة وتوطين PHD2/EGLN1

• PHD2/EGLN1 (Egl nine homolog 1)، المعروف أيضًا باسم HIF-prolyl hydroxylase 2 (HIF-PH2) أو PHD2، هو مستشعر خلوي للأكسجين مشفر بواسطة جين EGLN1. ينتمي إلى عائلة EGLN من إنزيمات البروليل هيدروكسيلاز وهو الإنزيم الرئيسي الذي ينظم استقرار عامل نقص الأكسجة المحرض (HIF) في ظل الظروف الطبيعية للأكسجين.
• تحت مستويات الأكسجين الطبيعية، يحفز PHD2 عملية الهيدروكسيل لبقايا برولين محددة داخل نطاقات التحلل المعتمدة على الأكسجين (ODD) في HIF-1α و HIF-2α. يعزز هذا التعديل ما بعد الترجمة التعرف عليه بواسطة معقد فون هيبل-لينداو (VHL) E3 يوبيكويتين ليغاز، مما يؤدي إلى التحلل البروتيني بواسطة البروتيازوم لوحدات HIFα الفرعية. وبالتالي، يتم قمع البرامج النسخية التي يتحكم فيها HIF.
• أثناء نقص الأكسجة، يقل نشاط PHD2، مما يسمح لبروتينات HIFα بالتراكم، والتشكل ثنائيًا مع HIF-1β، والانتقال إلى النواة لدفع التعبير عن الجينات المشاركة في تكوين الأوعية الدموية، تكوين كريات الدم الحمراء، التكيف الأيضي، وبقاء الخلية. هذه الآلية تكمن وراء تكيف الخلية مع انخفاض توفر الأكسجين.
• يتوطن PHD2 بشكل أساسي في السيتوبلازم ولكن يمكن اكتشافه أيضًا في النواة، بما يتوافق مع دوره في استشعار الأكسجين وتعديل بروتينات HIFα في كلا القسمين.
• يتم التعبير عنه على نطاق واسع في الأنسجة، مع ملاحظة أعلى مستويات mRNA في العضلات الهيكلية، القلب، الدماغ، الكلى، والغدة الكظرية (PubMed:11056053؛ PubMed:12351678). يتم اكتشاف البروتين في خلايا عضلة القلب، الخلايا البطانية الأبهرية، وعضلات الشريان التاجي الملساء. تظهر أنسجة الجنين أيضًا تعبيرًا كبيرًا، خاصة في الدماغ، القلب، الطحال، والعضلات الهيكلية (PubMed:12788921). مراجع ذات صلة: PMID:11056053 PMID:12351678 PMID:12788921
• يخضع PHD2 للعديد من التعديلات ما بعد الترجمة بما في ذلك الأسيتلة، الفسفرة، و S-nitrosylation، والتي قد تعدل نشاطه أو استقراره. يتطلب الحديد، 2-أوكسوجلوتارات، وحمض الأسكوربيك (فيتامين ج) كعوامل مساعدة لنشاطه ثنائي الأكسجيناز، ويحتوي على نطاق إصبع الزنك.
• ترتبط الطفرات في جين EGLN1 باحمرار الدم الخلقي من النوع 3 (ECYT3)، مما يسلط الضوء على دوره الحاسم في تنظيم الإريثروبويتين وإنتاج خلايا الدم الحمراء.

إرشادات تجريبية ونصائح تقنية

• المستضد المناعي المستخدم لإنتاج هذا الجسم المضاد المتعدد النسيلة هو بروتين مؤتلف يشمل تقريبًا الطول الكامل (الأحماض الأمينية 1-426) لبروتين PHD2/EGLN1 البشري، بما يتوافق مع التسلسل الأساسي. قد يميل هذا التصميم إلى التعرف على البروتين الذاتي عبر تطبيقات متعددة.
• لتطبيقات البقع الغربية (WB)، يجب ملاحظة حيز محدد يتوافق مع الوزن الجزيئي المتوقع البالغ حوالي 46 كيلو دالتون. يوصى بتحسين تحضير العينة، كمية التحميل، وظروف الكشف. قد تكون الضوابط الإيجابية المشتقة من الأنسجة ذات التعبير العالي عن PHD2، مثل العضلات الهيكلية أو القلب، مفيدة.
• في الكيمياء النسيجية المناعية (IHC-P) والمناعة المتألقة (IF/ICC)، ضع في اعتبارك اختبار مجموعة من طرق استرجاع المستضد وتخفيفات الجسم المضاد. نظرًا للتوطين المزدوج للسيتوبلازم/النواة لـ PHD2، يجب تقييم أنماط التلوين في سياق حالة الأكسجين الخلوية. يمكن أن تساعد الضوابط المناسبة لنوع النسيج أو خط الخلية (مثل الظروف الطبيعية للأكسجين مقابل نقص الأكسجة) في تأكيد النوعية.
• في الاختبارات القائمة على ELISA، قد يكون الجسم المضاد مناسبًا ككاشف للالتقاط أو الكشف بعد التحقق منه في مصفوفة العينة ذات الصلة. يجب على المستخدمين إجراء اختبارات التفاعل المتقاطع والتداخل وفقًا لمتطلبات بروتوكولهم المحدد.
• على الرغم من الإبلاغ عن أن هذا الجسم المضاد يتفاعل بشكل متقاطع مع PHD2/EGLN1 للفأر والجرذ، إلا أنه يُنصح بمطابقة التسلسل وإجراء تجارب أولية لتأكيد التفاعل المكافئ في هذه الأنواع للتطبيق المقصود.

CamelBio: جسر التوريد الشامل الخاص بك

تخدم CamelBio كشريك توريد شامل لشركات تصنيع IVD والمختبرات البحثية، حيث تقدم مجموعة واسعة من المواد الخام المؤهلة، من الأجسام المضادة والبروتينات المؤتلفة إلى الكواشف المساعدة. يدعم هذا الجسم المضاد المتعدد النسيلة ضد PHD2/EGLN1 التحقيقات في إشارات نقص الأكسجة، تكوين الأوعية الدموية، واكتشاف المؤشرات الحيوية للأورام، ويجسد جودة الأدوات المتاحة عبر منصتنا. سواء كنت تحتاج إلى أزواج أجسام مضادة متحقق منها، أجسام مضادة أحادية أو متعددة النسيلة بكميات كبيرة، أو مساعدة في توريد أهداف يصعب العثور عليها، فإن CamelBio تبسط عملية الشراء الخاصة بك لتسريع تطوير الاختبارات من المفهوم إلى التطبيق السريري.