جسم مضاد أحادي النسيلة مضاد لـ PCK1 ‏(PEPCK-C) للتلطخ الغربي وELISA - ‏P35558

المواصفات والمعايير الأساسية للمنتج

الخلفية البيولوجية: وظيفة PCK1 وتموضعه

• يُعد PCK1 ‏(فوسفوينول بيروفات كربوكسي كيناز 1) النظير السيتوسولي لإنزيم PEPCK، حيث يعمل كإنزيم محدِّد لمعدل استحداث السكر. ويحفّز نزع الكربوكسيل والفسفرة العكوسين للأوكسالوأسيتات لإنتاج فوسفوينول بيروفات، محققًا توازنًا بين التدفقات الكاتابليرية والأنابليرية في دورة حمض الستريك. المراجع ذات الصلة: PMID:24863970، PMID:26971250، PMID:28216384

• في ظروف انخفاض الغلوكوز، يدفع PCK1 التحويل الكاتابليري للأوكسالوأسيتات إلى فوسفوينول بيروفات من أجل استحداث السكر؛ أما في ظروف ارتفاع الغلوكوز، فإنه يعزز التحويل الأنابليري لفوسفوينول بيروفات إلى أوكسالوأسيتات. المراجع ذات الصلة: PMID:30193097

• بالإضافة إلى وظيفته الأيضية، تؤدي فسفرة PCK1 عند Ser-90 بواسطة AKT1 إلى تحويله إلى كيناز بروتين السيرين. ويحفّز هذا النشاط الكينازي الإضافي انتقاله إلى الشبكة الإندوبلازمية، حيث يفسفر INSIG1/2 لتحرير عوامل النسخ SREBP وتنشيط التعبير عن الجينات المولِّدة للدهون. المراجع ذات الصلة: PMID:32322062

• يسهم PCK1 في استتباب خلايا الذاكرة التائية CD8+ من خلال تزويد مسارات الغليكوجين وفوسفات البنتوز بفوسفوينول بيروفات (بالمماثلة).

• على المستوى الخلوي الفرعي، يوجد PCK1 غالبًا في السيتوسول، لكنه ينتقل إلى الشبكة الإندوبلازمية عند فسفرته بوساطة AKT.

• تشمل مواقع التعبير الرئيسية في الأنسجة الكبد والكلى والخلايا الشحمية، مما يعكس دوره المحوري في استقلاب الغلوكوز والدهون.

• تشمل التعديلات بعد الترجمة الأسيتلة واليوبيكويتنة والفسفرة، ومن الناحية البنيوية يُصنَّف PCK1 على أنه كيناز مرتبط بـ GTP، ولياز، ونزعة كربوكسيل.

الإرشادات التجريبية والنصائح التقنية

• تم تحضير المستضد المناعي باستخدام ببتيد اصطناعي يمتد عبر الأحماض الأمينية 523–622 بالقرب من النهاية الكربوكسيلية، بعيدًا عن موقع فسفرة Ser-90؛ لذا ينبغي مراعاة ذلك عند تصميم تجارب الكشف الخاصة بالفسفرة أو الخاصة بالنظائر البروتينية.
• بالنسبة للتلطخ الغربي، يُنصح بالتحقق من الكشف في محللات الكبد أو الكلى البشرية أو الفأرية أو الجرذانية، إذ تعبّر هذه الأنسجة عن مستويات مرتفعة من PCK1. وقد يؤدي تحفيز استحداث السكر (مثل الصيام/المعالجة بـ cAMP) إلى تعزيز الإشارة.
• في اختبار ELISA، اختبر توافق اقتران الأجسام المضادة وملاءمته للتنسيقات الساندويتش؛ إذ تضمن الطبيعة أحادية النسيلة خصوصية متسقة بين الدفعات.
• نظرًا إلى أن الوزن الجزيئي المتوقع يبلغ 69 كيلو دالتون، احرص على توفير دقة كافية للجل وظروف نقل مناسبة؛ فقد تؤدي التعديلات بعد الترجمة إلى تغيير موضع الحزمة المرصودة.

CamelBio: جسر التوريد الشامل الخاص بك

توفر CamelBio لمصنّعي التشخيص ومختبرات أبحاث الأيض وصولًا شاملًا إلى المواد الخام المعتمدة للاستخدام التشخيصي المخبري (IVD)، بما في ذلك الأجسام المضادة أحادية النسيلة ومتعددة النسائل مثل نسخة PCK1 هذه. بدءًا من الكواشف المساندة بكميات كبيرة ووصولًا إلى توفير المواد الخام النادرة المستهدِفة، ندعم كامل سير عمل تطوير الاختبارات لديك، مما يساعدك على الانتقال بسلاسة من الفكرة إلى العيادة. وبالنسبة لدراسات استحداث السكر أو السكري أو استقلاب الدهون، يمكن دمج توريد جسم PCK1 المضاد لدينا مع أزواج الأجسام المضادة المحسّنة والاستشارات التقنية.