جسم مضاد متعدد النسائل مضاد لـ Anti-p38 MAPK للاستخدام في WB وIHC-P وIF/ICC وIP وELISA - Q16539

المواصفات والمعايير الأساسية للمنتج

الخلفية البيولوجية: وظيفة p38 MAPK وتوضعه

• كيناز البروتين المنشّط بالميتوجين 14 (MAPK14)، المعروف شائعًا باسم p38 alpha، هو كيناز سيرين/ثريونين منشّط بالإجهاد وينتمي إلى عائلة MAP kinase. يوجد على هيئة عدة متساويات الشكل، بما في ذلك EXIP وMXI2، والتي تتولد من خلال التضفير البديل.

• عند تنشيطه بواسطة إشارات خارج الخلية مثل السيتوكينات المحفزة للالتهاب أو الإجهاد الفيزيائي، يعمل p38 على فسفرة الكينازات الواقعة downstream، وهي MSK1/2، التي تنظم بدورها عوامل النسخ (CREB1 وNF-κB وSTATs) والهستون H3 (PubMed:9687510، PubMed:9792677). كما ينشّط MK2/3 للتحكم في استقرار mRNA عبر ZFP36 وELAVL1، وينشّط MNK1/2 لفسفرة EIF4E2 من أجل بدء الترجمة (PubMed:11154262). المراجع ذات الصلة: PMID:9687510 PMID:9792677 PMID:11154262

• ينظم p38 معدل دوران البروتينات من خلال فسفرة ليغاز اليوبيكويتين SIAH2 (PubMed:17003045) ومثبط الاستماتة CFLAR، ويمكنه تثبيط الالتهام الذاتي من خلال التدخل في نقل ATG9 (PubMed:19893488). المراجع ذات الصلة: PMID:17003045 PMID:19893488

• في ديناميكيات المستقبلات، يحفّز p38 الاستدخال المعتمد على الكلاثرين لـ EGFR من خلال فسفرة EGFR نفسه وعوامل RAB5A المؤثرة (PubMed:16932740)، ويعزز طرح المجال خارج الخلية لربيطات عائلة TGF-α من خلال تنشيط إنزيم البروتين المعدني ADAM17 (PubMed:20188673). المراجع ذات الصلة: PMID:16932740 PMID:20188673

• يفسفر p38 النووي مباشرةً عوامل النسخ، بما في ذلك ATF1 وATF2 وATF6 وELK1 وTP53/p53 وMEF2A/C (PubMed:10330143، PubMed:9430721، PubMed:9858528)، ويعزز إمكانية وصول NF-κB إلى محفزات الجينات الالتهابية من خلال زيادة فسفرة الهستون H3 عند Ser-10. المراجع ذات الصلة: PMID:10330143 PMID:9430721 PMID:9858528

• يساهم p38 في تنظيم دورة الخلية من خلال فسفرة CDC25B/C، مما يؤدي إلى تأخير مرحلة G2 بعد التعرض للأشعة فوق البنفسجية (PubMed:11333986). كما أنه ضروري لتكوّن الكريات الحمر النمائي والمحفز بالإجهاد من خلال تنظيم التعبير عن جين EPO (PubMed:10943842). المراجع ذات الصلة: PMID:11333986 PMID:10943842

• أثناء العدوى، يمكن لـ EsxA من M. tuberculosis تنشيط p38 في الخلايا التائية، مما يؤدي إلى تثبيط إنتاج IFN-γ (PubMed:21586573). المراجع ذات الصلة: PMID:21586573

• يتوضع p38 في كل من السيتوبلازم والنواة. ويُعبَّر عنه على نطاق واسع، مع أعلى مستوياته في الدماغ والقلب والمشيمة والبنكرياس والعضلات الهيكلية، ومستويات أقل في الرئة والكبد والكلى. تشمل التعديلات بعد الترجمة الأستلة واليوبيكويتنة، وقد تم تحديده في دراسات البروتيوميات.

الإرشادات التجريبية والنصائح التقنية

• المستضد المناعي (الأحماض الأمينية 261–360 من p38 البشري) محفوظ بين الإنسان والفأر والجرذ، بما يتوافق مع التفاعل المتصالب للجسم المضاد. يُنصح بالتحقق من ذلك من خلال محاذاة التسلسل قبل التوسع إلى أنواع أخرى.
• في لطخة Western، استخدم ظروفًا مختزِلة ومُمسِخة، وابدأ بنطاق تخفيف للجسم المضاد قدره 1:500–1:2000؛ ثم حسّن الظروف باستخدام ضوابط إيجابية مناسبة (مثل HeLa وJurkat).
• في IHC-P، قد تكون هناك حاجة إلى استرجاع المستضد (مثل محلول سترات منظم بدرجة حموضة 6.0)؛ تحقق من نوعية التلوين باستخدام ببتيد الحجب أو ضوابط نسيجية من خلايا أو أنسجة فاقدة للجين.
• في IF/ICC، ثبّت العينات باستخدام PFA بتركيز 4% ونفّذ النفوذية باستخدام Triton X-100 بتركيز 0.1%؛ وأجرِ تلوينًا مشتركًا مع واسمات نووية/سيتوبلازمية.
• في IP، استخدم 1–2 ميكروغرام من الجسم المضاد لكل 500 ميكروغرام من محلول تحلل البروتين، ثم التقط المعقد باستخدام خرز Protein A/G.
• في ELISA، يمكن استخدام الجسم المضاد ككاشف التقاط أو كشف؛ اختبر توافقه مع جسم مضاد وحيد النسيلة مطابق.

CamelBio: جسر التوريد الشامل الخاص بك

توفر CamelBio لمصنّعي التشخيص والمختبرات البحثية مجموعة شاملة من المواد الخام الخاصة بالتشخيص المخبري (IVD)، بما في ذلك الأجسام المضادة المعتمدة التي تستهدف مسارات الإجهاد والالتهاب مثل p38 MAPK. ونوفر وصولًا شاملًا إلى أزواج الأجسام المضادة، والأجسام المضادة متعددة النسائل ووحيدة النسيلة المحسّنة، والكواشف المساعدة بكميات كبيرة، وخدمات التوريد المخصصة للأهداف النادرة. دع CamelBio تدعم تطوير اختبارك من مرحلة الفكرة إلى العيادة من خلال مواد موثوقة وخبرة تقنية.