مضاد متعدد النسائل لـ NRF2 لـ WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q16236

المواصفات والمعايير الأساسية للمنتج

الخلفية البيولوجية: وظيفة NRF2 وتوطينه

• يعتبر NRF2 (عامل النسائل المرتبط بعامل النخاع 2، المعروف أيضًا باسم NFE2L2) عامل نسائل مشفر بواسطة جين NFE2L2، بوزن جزيئي يبلغ ~68 كيلو دالتون. ينتمي إلى عائلة cap 'n' collar basic-region leucine zipper (CNC-bZIP).
• يلعب NRF2 دورًا مركزيًا في الدفاع الخلوي ضد الإجهاد التأكسدي عن طريق الارتباط بعناصر الاستجابة المضادة للأكسدة (ARE) في مناطق المروج للجينات الواقية للخلايا، بما في ذلك إنزيمات إزالة السمية من المرحلة 2، وبالتالي تحييد الإلكتروفيلات التفاعلية. مراجع ذات صلة: PMID:11035812, PMID:19489739, PMID:29018201
• في ظل الظروف الأساسية، يتم يبكتلة NRF2 وتحلله بسرعة في السيتوبلازم بواسطة معقد يوبيكيتين ليغاز E3 المكون من KEAP1-CUL3-RBX1. عند حدوث إجهاد تأكسدي أو إلكتروفيلى، يتم تثبيط KEAP1، مما يسمح لـ NRF2 بالتراكم، والانتقال إلى النواة، وتشكيل ثنائيات متغايرة مع بروتينات Maf الصغيرة، وتفعيل نسائل الجينات المستهدفة. مراجع ذات صلة: PMID:11035812, PMID:15601839, PMID:29018201, PMID:19489739, PMID:29590092
• تنشط الالتهام الذاتي الانتقائي أيضًا NRF2: يتفاعل مستقبل الالتهام الذاتي SQSQSTM1/p62 مع KEAP1، مما يؤدي إلى عزله وتفعيل KEAP1، وبالتالي تعزيز تراكم NRF2 النووي وتعبير الجينات الواقية للخلايا. مراجع ذات صلة: PMID:20452972
• أثناء استجابة البروتين غير المطوي (UPR)، يتم تنشيط NRF2، مما يساهم في التوازن الأحمري وبقاء الخلية تحت الإجهاد في الشبكة الإندوبلازمية.
• يقمع NRF2 الالتهاب الوسيط بالبلاعم عن طريق حظر نسائل السيتوكينات الالتهابية وتثبيط تجنوب بوليميراز RNA II بالقرب من الجينات الالتهابية، بشكل مستقل عن موضع الارتباط الكنوني لـ NRF2 ومستويات الجذور الحرة للأكسجين (ROS).
• يقيد NRF2 العدوى الفيروسية: يقوم بقمع استشعار الحمض النووي السيتوسولي المضاد للفيروسات عن طريق تثبيط تعبير STING1 ويمنع تكرار عدة فيروسات ممرضة (مثل SARS-CoV-2, HSV-1, Vaccinia, Zika) عبر آلية مستقلة عن الإنترفيرون من النوع الأول. مراجع ذات صلة: PMID:30158636, PMID:33009401
• يعبر عن NRF2 على نطاق واسع، مع أعلى مستويات في عضلات البالغين والكلى والرئة والكبد وعضلات الجنين. يتوطن في كل من السيتوبلازم والنواة، وينتقل بشكل ديناميكي استجابةً للإشارات الخلوية.

التوجيه التجريبي ونصائح تقنية

• تم إنتاج هذا الجسم المضاد متعدد النسائل ضد بروتين معاد التركيب يتوافق مع الأحماض الأمينية 366-605 من NRF2 البشري، مستهدفًا المنطقة الطرفية C. قد يكتشف الأشكال الكلية والمعدلة؛ فكر في التحقق من النوعية في نظامك التجريبي باستخدام ضوابط knockdown أو knockout.
• للترحيل الغربي (Western blotting)، من المتوقع ظهور نطاق حول 68 كيلو دالتون. قد تسبب التعديلات ما بعد الترجمة، مثل الفسفرة أو اليبكتلة، تحولًا في النطاق؛ قم بتحسين ضوابط التحميل ومواد الكشف.
• في IHC-P، تعتبر خطوات استرجاع المستضد والحجب حرجة. استخدم أنسجة تحكم إيجابية مثل الكبد أو الكلى، والتي تعبر عن مستويات عالية من NRF2.
• بالنسبة لـ IF/ICC، يجب تحسين ظروف الاختراق والتثبيت؛ يمكن تقييم الانتقال النووي لـ NRF2 تحت الإجهاد التأكسدي عن طريق مقارنة الخلايا المعالجة وغير المعالجة.
• قد تتضمن تطبيقات ELISA المزاوجة مع جسم مضاد ثانوي مناسب أو استخدام الجسم المضاد كجزء من زوج شطيرة (sandwich pair)؛ قم بالتحقق من الصحة باستخدام بروتين معاد التركيب أو مستخلصات الخلايا.

CamelBio: جسر التوريد الشامل الخاص بك

توفر CamelBio محفظة شاملة من المواد الخام للتشخيص المختبري (IVD)، بما في ذلك أجسام مضادة ومستضدات ومواد كيميائية مساعدة تم التحقق منها، لدعم مصنعي التشخيصات والمختبرات البحثية من التطوير إلى السوق. تم تصميم هذا الجسم المضاد متعدد النسائل لـ NRF2 للتطبيقات في أبحاث الإجهاد التأكسدي، والحماية الخلوية، والمناعة الفطرية. للطلبات بكميات كبيرة، أو تطوير أجسام مضادة مخصصة، أو توريد كواشف لأهداف مستهدفة نادرة، اتصل بـ CamelBio لتبسيط سلسلة التوريد الخاصة بك.