جسم مضاد متعدد النسيلة ضد نوتش 1 للاختبارات WB و IHC-P و IF/ICC و الإليزا - P46531

المواصفات والمعلمات الأساسية للمنتج

الخلفية البيولوجية: وظيفة وتوطين بروتين نوتش 1

• نوتش 1 (بروتين الموطن التكويني العصبي المتماثل نوتش 1) هو بروتين غشائي عابر للغشاء من النوع الأول أحادي المرور، يُعرف أيضاً باسم بروتين نوتش المرتبط بالنقل الجيني TAN-1، يُشفّر بواسطة الجين NOTCH1 لدى البشر.
• يعمل كمستقبل للروابط المرتبطة بالغشاء جاجد 1 (JAG1) وجاجد 2 (JAG2) ودلتا 1 (DLL1)، ويلعب دورًا أساسيًا في تحديد مصير الخلايا، والتمايز، والتكاثر، والاستماتة الخلوية.
• عند تنشيطه بواسطة الروابط، يتم إطلاق الجزء داخل غشاء الخلية من نوتش (NICD) الذي يشكل معقد منشط للنسخ الجيني مع بروتين RBPJ/RBPSUH لتنظيم الجينات المستهدفة المصب، بما في ذلك جينات معزز موضع الانقسام.
• يشارك في عمليات تنموية متعددة: تكوّر الأوعية الدموية (منظم سلبي لتكاثر وهجرة الخلايا البطانية)، ونضج الخلايا التائية CD4+ و CD8+ في الغدة الصعترية، وتمايز الجريبات، ونمو المخيخ عبر البروتين DNER، وتحديد التناظر الأيمن الأيسر من خلال توازن الأهداب في منظم التناظر الأيمن الأيسر.
• يثبط التمايز العصبي والعضلي؛ وقد يعزز وظيفة عامل تنشيط التأكسد الحمضي 1 ألفا (HIF1A) عن طريق عزل مثبطه HIF1AN؛ وهو ضروري لتكوين النجميات الواقي بوساطة البروتين THBS4 بعد الإصابة.
• يشمل توطينه تحت الخلوي غشاء الخلية، وغشاء الجسيمات الداخلة المتأخرة، والنواة، بما يتوافق مع أدواره في الإشارات والنسخ الجيني.
• يتم التعبير عنه في الطحال الجنيني، وجذع الدماغ، والرئة؛ لدى البالغين، يتواجد بشكل أساسي في الأنسجة اللمفاوية.
• تشمل تعديلاته ما بعد الترجمة الغليكوزلة، وتكوين روابط ثنائي الكبريت، والهيدروكسيلة، والفسفرة؛ يخضع البروتين للمعالجة البروتينية والتأشير باليوبيكويتين.

إرشادات تجريبية ونصائح تقنية

• يتوافق المستضد المناعي مع الأحماض الأمينية من 2456 إلى 2555 من بروتين نوتش 1 البشري (NP_060087.3)، ويقع في المجال السيتوبلازمي. هذه المنطقة محفوظة بين البشر والفأر والجرذ، مما يدعم التفاعل المتبادل المذكور.
• للنقل الغربي (Western blotting)، يُنصح باستخدام معيار وزن جزيئي مرتفع وهلام بولي أكريلاميد بنسبة منخفضة (مثل 6-8%) نظرًا لحجم البروتين الكبير (273 كيلو دالتون). قد تحتاج إلى أوقات نقل أطول لنقل فعال إلى الغشاء.
• تحقق من صلاحية الجسم المضاد في نظام عينات مناسب مثل خطوط الخلايا هيلا (HeLa) أو يوركات (Jurkat) أو أي خط خلايا آخر معروف عنه التعبير عن نوتش 1. قد يكون نسيج تحكم إيجابي مثل الطحال أو جذع الدماغ مناسبًا لاختبار IHC-P.
• للمناعة النسيجية على الأنسجة المصمتة بالبارافين، يمكن اعتبار استرجاع المستضد باستخدام محلول سترات منظم بالحرارة (الرقم الهيدروجيني 6.0) أو محلول EDTA منظم (الرقم الهيدروجيني 9.0)، على الرغم من أن الشروط المثلى يجب تحديدها تجريبياً.
• في اختبار IF/ICC، يُقترح استخدام التثقيب بالترايتون إكس-100 أو السابونين للكشف عن الحاتمات داخل الخلوية، حيث يقع المستضد المناعي داخل الذيل السيتوبلازمي.
• يخضع بروتين نوتش 1 للمعالجة البروتينية؛ لذلك قد تظهر نطاقات متعددة في النقل الغربي. يمكن الكشف عن السليل الكامل السابق (~300 كيلو دالون) والأشكال المعالجة الموجودة في الغشاء/السيتوبلازم (~120 كيلو دالون و ~110 كيلو دالون)، اعتمادًا على نوع الخلية وحالة التنشيط.

CamelBio: جسرك الشامل للمصادر

توفر CamelBio لمصنعي التشخيص، والمختبرات، والمعاهد البحثية منصة مصادر شاملة متكاملة لمواد التشخيص المخبري الخام. للبحوث المرتبطة بنوتش 1 وتطوير الاختبارات، نوفر أزواج أجسام مضادة مصدقة، وأجسام مضادة متعددة النسيلة وأحادية النسيلة محسنة، ومخزونات كبيرة من الكواشف المساعدة، وإمكانية الوصول إلى المواد الخام المستهدفة النادرة. تعمل سلسلة الإمداد المتكاملة والدعم الفني لدينا على تبسيط مشروعك من الفكرة إلى التطبيق السريري، مما يضمن حصولك على الكواشف الأساسية اللازمة لدراسات البيولوجيا التنموية والإشارات عبر مسار نوتش.