جسم مضاد أحادي النسيلة مضاد للفأر Ki67 () لقياس التدفق الخلوي (داخل الخلايا) - E9PVX6

المواصفات والمعايير الأساسية للمنتج

الخلفية البيولوجية: وظيفة وتوضع Ki67

• بروتين Ki67، الذي يشفر بواسطة جين Mki67، هو بروتين كبير يمثل علامة على التكاثر بوزن جزيئي يبلغ حوالي 351 كيلو دالتون (350864 دالتون وفقاً لـ UniProt) ويرتبط بالكروموسومات الانقسامية. يعمل كطارد للكروموسومات خلال الانقسام الفتيلي المبكر وجاذب للكروموسومات خلال الانقسام الفتيلي المتأخر، مما يضمن تشتت الكروموسومات وتجمعها بشكل صحيح (PubMed:27362226). المراجع ذات الصلة: PMID:27362226
• خلال الانقسام الفتيلي المبكر، ينتقل Ki67 من النويات إلى سطح الكروموسوم، مكوناً هياكل ممتدة تشبه الفرشاة. توفر هذه الهياكل حاجزاً فراغياً وكهربائياً، وتعمل كعامل خافض للتوتر السطحي لمنع انهيار الكروموسومات وتمكين الحركة المستقلة (PubMed:27362226). المراجع ذات الصلة: PMID:27362226
• في طور الصعود (Anaphase)، يؤدي نزع الفسفرة عن Ki67 وكشف رقعة قاعدية محفوظة إلى تحفيز فصل الطور السائل-السائل المعتمد على الحمض النووي الريبي (RNA) على سطح الكروموسوم، مما يعزز تجمع الكروموسومات ويسهل إعادة تجميع النواة. هذا الانتقال الطوري يحول Ki67 من طارد إلى جاذب.
• يرتبط Ki67 بالحمض النووي مع تفضيل للحمض النووي فائق الالتفاف والغني بـ AT، كما يرتبط بالحمض النووي الريبي الريبوسومي الأولي خلال طور الصعود، مما يساهم في فصل الطور. ومع ذلك، فإنه لا يساهم في الهيكل الداخلي للكروموسومات الانقسامية (PubMed:26949251). المراجع ذات الصلة: PMID:26949251
• خلوياً، يتوضع Ki67 في النوية خلال الطور البيني وينتقل إلى سطح الكروموسوم أثناء الانقسام الفتيلي. يتم التعبير عنه بشكل أساسي في الخلايا المتكاثرة، مما يجعله علامة موثوقة لتنشيط دورة الخلية.
• تشمل التعديلات بعد الترجمة الأستلة، والفسفرة، واليوبيكويتين، والتي تنظم وظائفه الانقسامية وتوضعه الديناميكي.

التوجيه التجريبي والنصائح التقنية

• لقياس التدفق الخلوي داخل الخلايا، استخدم طريقة نفاذية متوافقة مع المستضدات النووية، مثل المخازن المؤقتة القائمة على الميثانول أو السابونين، لضمان وصول الجسم المضاد إلى Ki67 في النوية وعلى الكروموسومات.
• قم بمعايرة الجسم المضاد بتركيز يتراوح بين 0.1–1 ميكروجرام لكل 10^6 خلية لتحديد تركيز التلوين الأمثل لنوع خليتك وبروتوكولك الخاص.
• قم بتضمين تحكم إيجابي، مثل خطوط خلايا الفأر المتكاثرة (على سبيل المثال، NIH/3T3، CTLL-2) أو الخلايا الليمفاوية الأولية المحفزة، وتحكم سلبي (على سبيل المثال، تحكم النظير أو الخلايا الساكنة) للتحقق من خصوصية التلوين.
• ثبّت الخلايا بسرعة للحفاظ على توزيع Ki67؛ قد يؤثر التخزين الطويل على سلامة الحاتمة (epitope). يُستخدم عادةً التثبيت بالبارافورمالدهيد متبوعاً بالنفاذية.
• يتوافق مترافق مع الكشف بالليزر الأحمر القياسي (633–647 نانومتر)؛ تأكد من استخدام مجموعات المرشحات المناسبة والتعويض الأدنى في حالة تعدد الإرسال.

CamelBio: جسرك الشامل للمصادر

CamelBio هو شريكك المتفاني في الحصول على المواد الخام للتشخيص المختبري (IVD)، حيث يقدم مجموعة شاملة من الخدمات من المفهوم إلى العيادة. يعد هذا الجسم المضاد لـ Ki67 جزءاً من مجموعتنا من علامات تكاثر الخلايا والأورام، مدعوماً بقدرتنا على توفير أزواج أجسام مضادة معتمدة، وبروتينات معاد تركيبها محسنة، وكواشف مساعدة. سواء كنت بحاجة إلى أجسام مضادة أحادية النسيلة بكميات كبيرة أو حلول مواد خام مخصصة لتطوير التشخيص، اتصل بـ CamelBio للحصول على دعم موثوق وشامل.