مضاد وحيد النسيلة ضد KIR2DL2/KIR2DL3 لـ WB, IF/ICC, FC, ELISA - P43628

المواصفات والمعلمات الأساسية للمنتج

الخلفية البيولوجية: وظيفة KIR2DL2/KIR2DL3 وتوطينه

• KIR2DL3 (مستقبل الخلايا القاتلة الشبيه بالغلوبولين المناعي 2DL3، المعروف أيضاً باسم CD158b، مستقبل p58 للخلايا القاتلة الطبيعية، NKAT2) هو عضو بروتين سكري عبر الغشاء من النوع الأول في عائلة KIR. يعمل كمستقبل مثبط على الخلايا القاتلة الطبيعية (NK) لأنماط HLA-C محددة، بما في ذلك HLA-Cw1 و Cw3 و Cw7.
• يحتوي المستقبل على نطاقين خارج الخلويين يشبهان الغلوبولين المناعي من النوع C2، ولولب واحد عبر الغشاء، وذيل سيتوبلازمي يحتوي على مواضع تثبيط الموجهة للتيروزين في مستقبلات المناعة (ITIMs) التي تجمع الفوسفاتازات لمنع الإشارات المنشطة.
• يقتصر تعبير KIR2DL3 إلى حد كبير على الخلايا القاتلة الطبيعية، حيث يتوسط التسامح الذاتي ويراقب غياب الذات من خلال مراقبة تعبير معقد التوافق النسيجي الرئيسي من الفئة الأول (MHC class I) على الخلايا المستهدفة.
• يؤدي تفاعل KIR2DL3 مع ربيطته إلى قمع السمية الخلوية التي تتوسطها الخلايا القاتلة الطبيعية، مما يمنع تحلل الخلايا السليمة مع السماح بقتل الخلايا التي قللت من تعبير HLA-C.
• يخضع النطاق خارج الخلوي للسكرة المرتبطة بالنتروجين وتكوين روابط ثنائية الكبريتيد، مما يساهم في ظهور أشكال وزن جزيئي متعددة (~27 كيلو دالتون غير مخلّط و ~37-38 كيلو دالتون مخلّط).
• KIR2DL2، المشفر بواسطة جين مميز، يتشارك في حوالي 96% من هوية الأحماض الأمينية مع KIR2DL3 ويظهر خصوصية مشابهة لـ HLA-C؛ يغطي المستضد للجسم المضاد (الأحماض الأمينية 22-245 من KIR2DL3) منطقة محفوظة بين المستقبلين، مما يتيح الكشف المتقاطع.
• يمكن أن ينتج التوصيل البديل لنسخة KIR2DL3 متغيرات ذات خصائص ربط أو إشارات مختلفة للربيطة، على الرغم من أن الشكل الكامل الطول هو الشكل الوظيفي السائد.

التوجيه التجريبي ونصائح تقنية

• للترحيل الغربي (Western blotting)، توقع نطاقات حول 27 كيلو دالتون (غير مخلّط) و 37-38 كيلو دالتون (الشكل المخلّط). استخدم ظروفاً مختزلة وحمل مستخلصات كاملة من خطوط خلايا NK إيجابية لـ KIR (مثل NK92، YTS) كعناصر تحكم إيجابية. فكر في إزالة السكرة باستخدام PNGase F لتبسيط نمط النطاقات.
• بما أن المستضد يغطي النطاق خارج الخلوي، فإن الجسم المضاد يتعرف على مستقبل السطح الطبيعي؛ لقياس التدفق الخلوي والمناعة بالفلorescence، لا حاجة لاختراق الغشاء (permeabilization) لتلطيخ السطح. قم بتعديل تركيز الجسم المضاد وأضف عنصر تحكم من النوع المتماثل (isotype control) لضمان الخصوصية على الخلايا وحيدة النواة المحيطية البشرية (PBMCs) أو الخلايا القاتلة الطبيعية المعزولة.
• لتطبيقات ELISA، يمكن لهذا الجسم المضاد وحيد النسيلة أن يعمل بمثابة عامل التقاط أو الكشف؛ إذا كنت تبني اختبار مناعي شطيري (sandwich immunoassay)، اقترنه برابط ل epitope منفصل. تحقق من الصحة باستخدام بروتين KIR2DL3 المؤلف أو مستخلصات الخلايا.
• تأكد من التفاعل المتقاطع مع KIR2DL2 عن طريق الاختبار في خطوط خلايا تعبر عن كل مستقبل على حدة (مثل الخلايا المحولة 293T)، نظراً للتشابه العالي في التسلسل.
• نظراً لتعدد الأشكال (polymorphism) في KIR، قد تختلف أنماط التلطيخ بين المانحين؛ قم بتحسين تركيز الجسم المضاد لكل تطبيق ونوع من الخلايا.

CamelBio: جسر التوريد الشامل الخاص بك

توفر CamelBio للمصنعين التشخيصيين والمختبرات ومعاهد البحث وصولاً شاملاً في مكان واحد للمواد الخام لتشخيصات المختبر (IVD)، والخدمات التقنية، والاستشارات. تشمل محفظتنا أزواجاً من الأجسام المضادة تم التحقق من صحتها، وأجساماً مضادة وحيدة ومتعددة النسيلة محسّنة، ومواد مساعدة بالجملة، وتوريداً للأهداف النادرة لدعم أبحاث علم الأورام المناعية والخلايا القاتلة الطبيعية. مع هذا الجسم المضاد وحيد النسيلة ضد KIR2DL2/KIR2DL3، نتيح الكشف الدقيق عن المستقبلات للاختبارات الوظيفية والتطوير التشخيصي.