جسم مضاد وحيد النسيلة ضد HIBADH لتقنيات WB، IHC-P، IF/ICC، ELISA - P31937

المواصفات والمعايير الأساسية للمنتج

الخلفية البيولوجية: وظيفة HIBADH وموقعه الخلوي

• HIBADH (3-هيدروكسي أيزوبوتيرات ديهيدروجيناز) هو إنزيم ميتوكوندريا ينتمي إلى عائلة الإنزيمات المؤكسدة المختزلة، ويستخدم NAD كعامل مساعد.
• يلعب دورًا رئيسيًا في تحلل الأحماض الأمينية متفرعة السلسلة (الفلين، الليوسين، الأيزوليوسين)، وتحديدًا في تحويل 3-هيدروكسي أيزوبوتيرات إلى ميثيلمالونات شبه الألدهيد.
• يتمركز البروتين في الميتوكوندريا، كما يشير ببتيد العبور الميتوكوندريا الخاص به، الذي يتم شطره لإنتاج الإنزيم الناضج.
• تشمل التعديلات ما بعد الترجمة الأستلة، التي قد تنظم نشاطه الإنزيمي أو ثباته.
• تم الكشف عن تعبير HIBADH في الأرومات الليفية الجلدية؛ ويمكن استنتاج تعبيره في الأنسجة الأخرى بناءً على دوره الأيضي.
• قدمت الدراسات الهيكلية بنية ثلاثية الأبعاد لـ HIBADH، مما يساعد في فهم آليته التحفيزية والتعرف على الركازة.
• تم تحديد البروتين من خلال تسلسل البروتين المباشر وطرق البروتيوميات، مما يؤكد وجوده في الميتوكوندريا البشرية.

إرشادات تجريبية ونصائح تقنية

• المستضد المناعي يوافق الأحماض الأمينية من 37 إلى 336 من بروتين HIBADH البشري (NP_689953.1)، وهو يستبعد ببتيد العبور الميتوكوندريا المتوقع (الأحماض الأمينية الـ 36 الأولى تقريبًا)، لذلك من المرجح أن يتعرف الجسم المضاد على الصورة الناضجة الميتوكوندريا للبروتين.
• في تقنية النقل اللطفي (WB)، يتوقع ظهور نطاق عند حوالي 35 كيلو دالتون (وهو يتوافق مع الوزن الجزيئي المذكور في قاعدة بيانات UniProt البالغ 35.3 كيلو دالتون). أكد الخصوصية باستخدام الضوابط الإيجابية والسلبية المناسبة (مثل الخلايا التي تعبر عن HIBADH بكميات زائدة أو الأنسجة المعروفة بالتعبير عنه).
• في الكيمياء المناعية المناعية (IHC-P) والمناعة الفلورية (IF/ICC)، يجب ملاحظة أنماط التلوين الميتوكوندريا. يمكن أن يساعد التوضع المشترك مع الواسمات الميتوكوندريا في التحقق من الخصوصية.
• يتفاعل الجسم المضاد بشكل متبادل مع HIBADH البشري والفأري والجرذي؛ عند استخدام عينات القوارض، تحقق من تماثل التسلسل في منطقة المستضد المناعي لضمان تفاعل مماثل.
• بالنسبة لتطبيقات ELISA، فكر في استخدام المستضد المناعي المؤتشف كضابط إيجابي وقم بمعايرة تركيز الجسم المضاد للحصول على نسبة إشارة إلى ضوضاء مثالية.
• لتقليل الارتباط غير المحدد، يوصى باستخدام محاليل حظر مناسبة (مثل 5% من الحليب الخالي من الدسم أو الألبومين المصل البقري) وتحسين التخفيف المناسب.

CamelBio: جسرك الشامل لتوريد المواد الحيوية

تدعم CamelBio مصنعي التشخيص والباحثين من خلال توفير أزواج الأجسام المضادة التي تم التحقق من صلاحيتها، والأجسام المضادة وحيدة/متعددة النسيلة المحسنة، والكواشف المساعدة بكميات كبيرة، وخدمة توريد المواد الخام للأهداف النادرة. للبحث في أمراض الأيض والأمراض الميتوكوندريا، تقدم CamelBio كواشف خاصة بـ HIBADH وحلول مواد خام قابلة للتخصيص لتسريع تطوير الاختبارات. تضمن سلسلة التوريد الشاملة لدينا انتقالًا سلسًا من الفكرة إلى التطبيق السريري.