جسم مضاد أرنب متعدد النسيلة مضاد لـ HDAC3 للاستخدام في WB، IHC-P، IF/ICC، ELISA - O15379

مواصفات ومعايير المنتج الأساسية

الخلفية البيولوجية: وظيفة وتوطين HDAC3

• HDAC3 هو هيستون ديستيلاز من الفئة الأولى يحفز نزع مجموعة الأسيتيل من بقايا اللايسين على الأطراف الطرفية N للهستونات الأساسية (H2A، H2B، H3، H4)، مما يؤدي إلى بنية كروماتين مكثفة وقمع نسخي فوق جيني.
  مراجع ذات صلة: PMID:21030595، PMID:23911289
• يعمل كجزء من معقدات مثبطة متعددة البروتينات مثل N-Cor، ويتم تجنيده بواسطة عوامل النسخ مثل BCL6 لنزع الأسيتيل من H3K27 في عناصر المعززات، مما يعاكس نشاط EP300.
  مراجع ذات صلة: PMID:23911289، PMID:22230954
• بالإضافة إلى الهستونات، يقوم HDAC3 بنزع الأسيتيل من مجموعة من الركائز غير الهستونية بما في ذلك RARA، STAT3، MAPK14، و MEF2D، مما يؤثر على مسارات تتراوح من الالتهاب إلى بقاء الخلية.
  مراجع ذات صلة: PMID:15653507، PMID:21030595، PMID:21444723، PMID:28167758
• يعمل HDAC3 أيضًا كإنزيم نازع للأسيل من بروتين-لايسين، حيث يزيل التعديلات الأسيلية غير الأسيتيلية مثل الكروتونيل (نزع الكروتونيل)، واللاكتيل (نزع اللاكتيل)، ومجموعات 2-هيدروكسي أيزوبيوتيريل، مع ركائز مثل MAPRE1/EB1 و NBN/NBS1.
  مراجع ذات صلة: PMID:28497810، PMID:29192674، PMID:34608293، PMID:38961290
• في الساعة البيولوجية، يؤدي HDAC3 أدوارًا مستقلة عن نشاط نزع الأسيتيل: فهو يعزز يوبيكويتينة BMAL1 ويستقر بروتينات CRY، مما ينظم بالتالي التعبير الجيني اليومي واستقلاب الدهون في الكبد.
• على مستوى الخلية الفرعية، يتواجد HDAC3 بشكل أساسي في النواة ومرتبط بالكروموسوم، ولكنه يُكتشف أيضًا في السيتوبلازم، بما يتوافق مع أدواره في التنقل.
• يتم التعبير عن HDAC3 على نطاق واسع في الأنسجة، وهو بروتين فوسفوري مع تقطيع بديل وشركاء تفاعل متعددين، مما يفسر مشاركته في عمليات بيولوجية متنوعة.

إرشادات تجريبية ونصائح تقنية

• يستهدف المستولد المضاد (الأحماض الأمينية 299–428) المنطقة الطرفية C من بروتين HDAC3 البشري، وهي محفوظة في الفأر والجرذ (كما هو موضح في بيانات التفاعل التبادلي)؛ تحقق من التفاعل التبادلي في نظامك النموذجي المحدد.
• في لطخة ويسترن، يبلغ الوزن الجزيئي المتوقع لـ HDAC3 حوالي 49 كيلو دالتون؛ استخدم معايير بروتين مناسبة وتأكد من خصوصية النطاق باستخدام خلايا مُسكّنة بـ siRNA أو مستخلصات خلايا معدلة وراثيًا (KO) إذا كانت متوفرة.
• لـ IHC-P، قد تكون هناك حاجة إلى طرق استرجاع المستضد (مثل عازل سترات الرقم الهيدروجيني 6.0، باستخدام الحرارة)؛ اختبر مجموعة من تخفيفات الجسم المضاد (مثل 1:50–1:200) على أنسجة تحكم.
• لـ IF/ICC، ثبت الخلايا باستخدام 4% بارافورمالدهيد (PFA) واجعلها منفذة باستخدام 0.1% تريتون X-100؛ يجب ملاحظة التوطين النووي؛ قم بتضمين ضوابط تحتوي على الجسم المضاد الثانوي فقط.
• لـ ELISA، يمكن استخدام الجسم المضاد في صيغ مباشرة أو غير مباشرة؛ قم بمعايرة التركيز ضد بروتين HDAC3 المؤتلف لتحديد تركيزات الطلاء والكشف المثلى.
• قم بتخزين الجسم المضاد عند -20 درجة مئوية في أجزاء صغيرة؛ تجنب دورات التجميد والذوبان المتكررة للحفاظ على الأداء.

CamelBio: جسر التوريد الشامل الخاص بك

كمورد رئيسي لمواد التشخيص الأولية، توفر CamelBio لمصنعي التشخيص والمختبرات وصولاً مريحًا إلى أجسام مضادة عالية الجودة مثل هذا الجسم المضاد الأرنب المتعدد النسيلة المضاد لـ HDAC3، المثالي لأبحاث الكروماتين والتخلق المتعاقب. إلى جانب الكواشف الفردية، نقدم أزواج أجسام مضادة مُتحقق من صحتها، وأجسام مضادة أحادية/متعددة النسيلة بكميات كبيرة، وبروتينات مساعدة، وتوريد مخصص للأهداف النادرة، مما يدعم سير عمل تطوير الاختبار بالكامل من الاكتشاف إلى التحقق.