جسم مضاد وحيد النسيلة أرانبي ضد eIF4E [مُعتمد KD] لـ WB و IF/ICC و IP و ELISA - P06730

المواصفات والمعاملات الأساسية للمنتج

الخلفية البيولوجية: وظيفة eIF4E وموقعه الخلوي

• عامل بدء الترجمة حقيقي النواة 4E (eIF4E)، المعروف أيضاً باسم eIF4E1، الوحدة الفرعية 25 كيلو دالتون من eIF-4F، أو بروتين رابط لقبعة الرنا المرسال، يتم ترميزه بواسطة الجين EIF4E (معرّف الجين: 1977). يؤدي وظيفتين مزدوجتين في السيتوبلازم لبدء الترجمة وفي النواة لتصدير الرنا المرسال (PubMed:11606200, PubMed:22578813, PubMed:22684010).
  المراجع ذات الصلة:
  PMID:11606200, PMID:22578813, PMID:22684010

• يرتبط eIF4E تحديداً ويرتبط بقبعة 7-ميثيل غوانوزين (m7G) في الطرف 5' للرنا المرسال، وهي خطوة حاسمة تسهل توظيف الريبوسوم وفك بنية الرنا المرسال الثانوية (PubMed:16271312, PubMed:22578813). جنباً إلى جنب مع EIF4G1، يتيح الترجمة المعتمدة على عنصر TISU، متجاوزاً الحاجة إلى المسح الريبوسومي (PubMed:29987188).
  المراجع ذات الصلة:
  PMID:16271312, PMID:22578813, PMID:29987188

• إلى جانب بدء الترجمة، ينظم eIF4E استقرار وتخزين الرنا المرسال السيتوبلازمي. في أجسام P، يشارك في مركب يعزل الرنا المرسال المكبوح ترجمياً، ويمنع تحلله (PubMed:24335285).
  المراجع ذات الصلة:
  PMID:24335285

• يسهل eIF4E التصدير النووي لمجموعة فرعية من الرنا المرسال، بما في ذلك NOS2/iNOS و MDM2، من خلال التفاعلات مع عنصر 4ESE ومسار التصدير LRPPRC–XPO1، مما يؤثر بذلك على عمليات مثل الاستماتة وتقدم دورة الخلية (PubMed:23471078, PubMed:22684010).
  المراجع ذات الصلة:
  PMID:23471078, PMID:22684010

• على المستوى تحت الخلوي، يتركز eIF4E في السيتوبلازم، وأجسام P، وحبيبات الإجهاد، وكذلك النواة (بما في ذلك النقط النووية والأجسام النووية)، مما يعكس أدوارها متعددة الجوانب.

• يخضع eIF4E للفسفرة (مثل في الموقع Ser209) الذي ينظم تقارب ارتباطه بالقبعة ونشاطه في الترجمة. كما تم الإبلاغ عن الأستلة، ويخضع البروتين للربط البديل، مما ينتج أشكالاً وحدات كتلتها الجزيئية حوالي 25-29 كيلو دالتون.

إرشادات تجريبية ونصائح تقنية

• المستضد المناعي، وهو ببتيد اصطناعي يغطي البقايا 1-100 من eIF4E البشري (NP_001959.1)، يستهدف المنطقة الطرفية N المحفوظة. بناءً على تماثل التسلسل، من المتوقع حدوث تفاعل متصالب مع متماثلات الفأر والجرذ والقرد، كما أكده المورد.
• في النشاف الغربي (WB)، توقع نطاقات تتوافق مع الأشكال الوحدية 25 كيلو دالتون و 27 كيلو دالتون و 29 كيلو دالتون؛ يجب تحسين ضوابط التحميل وظروف الحظر حسب نوع العينة.
• للمناعة الفلورية (IF/ICC)، يظهر eIF4E عادةً إشارة سيتوبلازمية منتشرة مع تلطيخ نووي نقطي؛ قد تحتاج بروتوكولات التثبيت والنفاذ إلى التعديل حسب خط الخلية.
• هذا الجسم المضاد معتمد للترسيب المناعي (IP) و ELISA؛ للفحوصات الكمية، قم بتضمين الضوابط الإيجابية والسلبية المناسبة.
• نظراً لمشاركة eIF4E في مركبات متعددة، قد يترسب الترسيب المناعي الأصلي شركاء التفاعل معه؛ يمكن استخدام ظروف التحلل المنحل بال denaturing لعزل eIF4E الكلي.

CamelBio: جسرك الشامل لتوفير المواد

CamelBio هي شريكك الشامل للمواد الخام للتشخيص *in vitro*، تربط بين مصنعي التشخيص ومختبرات الأبحاث بالكواشف الحيوية الأساسية. يمثل هذا الجسم المضاد وحيد النسيلة الأرانبي ضد eIF4E مثالاً على التزامنا بتوفير أجسام مضادة عالية الجودة ومعتمدة لدراسات بدء الترجمة وأيض الرنا المرسال. من الكواشف المساعدة بكميات كبيرة إلى إنتاج الأجسام المضادة وحيدة النسيلة المخصصة وتوفير الأهداف النادرة، تدعمك خدماتنا المتكاملة من مرحلة الفكرة إلى المرحلة السريرية.