جسم مضاد متعدد النسيلة ضد EIF3J لـ WB، IF/ICC، ELISA - O75822

المواصفات والمعاملات الأساسية للمنتج

الخلفية البيولوجية: وظيفة EIF3J وموقعه الخلوي

• هوية البروتين: EIF3J (الوحدة J من عامل بدء الترجمة حقيقية النواة 3)، المعروف أيضاً باسم EIF3S1 و eIF3-p35 و eIF3-alpha، يُرمز له بواسطة جين EIF3J (معرف الجين 8669). وهو وحدة أساسية في مركب eIF3 الذي يبلغ وزنه نحو 800 كيلو دالتون.
• الوظيفة الأساسية في بدء الترجمة: EIF3J هو مكون من مركب eIF-3 الضروري لتخليق البروتينات في حقيقيات النواة. يرتبط eIF-3 بالوحدة الريبوسومية 40S ويسهل تجنيد eIF-1 و eIF-1A و eIF-2:GTP:ميثيونيل-tRNAi و eIF-5 لتشكيل المركب ما قبل البدء 43S (43S PIC). كما يحفز تجنيد الرنا المرسال إلى المركب 43S PIC وعملية المسح للتعرف على كودون البدء AUG. المراجع ذات الصلة: PMID:25849773, PMID:27462815
• إعادة تدوير الريبوسومات: يلزم مركب eIF-3 لتفكيك وإعادة تدوير مجمعات الريبوسومات بعد الانتهاء، مما يمنع الارتباط المبكر بين الوحدتين 40S و 60S قبل بدء الترجمة.
• الدور التنظيمي في الترجمة: يستهدف مركب eIF-3 بشكل انتقائي ويتحكم في ترجمة مجموعة فرعية من الرنا المرسال المشاركة في تكاثر الخلايا وتمايزها والاستماتة، ويستخدم أنماط ارتباط مختلفة بحلقات الرنا الجذعية لممارسة التنشيط أو القمع الترجمي. المراجع ذات الصلة: PMID:25849773
• الموقع داخل الخلية: يوجد بشكل غالب في السيتوبلازم، وهو ما يتوافق مع دوره في بدء الترجمة على الريبوسومات السيتوبلازمية.
• التعديلات بعد الترجمة: يمكن أن يخضع EIF3J للأسيتلة والفسفرة، والتعديل عبر تكوين رابطة أيزوببتيد (شبيه باليوبيكويتين)، واليوبيكويتن، كما تؤكد الدراسات البروتيومية. قد تنظم هذه التعديلات تجميع المركبات ونشاطها.
• الربط البديل: توجد عدة أنواع نصوصية لجين EIF3J، قد تنتج أشكالاً إسوية بوظائف أو أنماط تعبير مميزة.

إرشادات تجريبية ونصائح تقنية

• تصميم المستضد المناعي: تم تحضير هذا الجسم المضاد ضد بروتين مؤتشف يغطي الأحماض الأمينية 1-258 من EIF3J البشري. من المرجح أن تكون هذه المنطقة الطرفية N محفوظة عبر الأنواع، مما يدعم التفاعل المتبادل الملاحظ مع الفأر والجرذ. يجب أن يكشف عن EIF3J الداخلي كامل الطول في الأنواع ذات الصلة.
• النقل الغربي (WB): استخدم محلل الخلايا الكاملة من عينات الإنسان أو الفأر أو الجرذ. الوزن الجزيئي المتوقع هو نحو 29 كيلو دالتون. تحقق من النوعية بتضمين ضوابط الإسكات والتعبير الزائد، وقم بتحسين كميات التحميل لتجنب التشبع.
• المناعة الفلورية / ICC: يوجد EIF3J في السيتوبلازم؛ قم بنفاذ الخلية بمادة منخفضة الفعالية السطحية (مثل 0.1% Triton X-100) وأوقف التفاعلات غير النوعية بمصل مناسب لنوع العائل. اختبر تخفيفات الجسم المضاد بدءاً من 1:50 إلى 1:200.
• ELISA: أكد الارتباط باستخدام بروتين EIF3J المؤتشف أو الببتيد المقابل لتسلسل المستضد المناعي. قم بتحسين تركيز الطلاء (عادة 1-10 ميكروغرام/مل) وظروف الكشف.
• معالجة العينات: اشحن على أكياس ثلج؛ عند الوصول، خزن الأجزاء المقسمة عند درجة حرارة -20 درجة مئوية إلى -80 درجة مئوية. تجنب دورات التجميد والذوبان المتكررة.

CamelBio: جسرك الشامل للحصول على المصادر

تقدم CamelBio لمصنعي التشخيص والمختبرات ومعاهد البحوث إمكانية الوصول الشامل إلى المواد الخام للتشخيص في المختبر والخدمات التقنية والاستشارات - تغطي كل مرحلة من الفكرة إلى العيادة. بالنسبة لـ EIF3J وعوامل بدء الترجمة الأخرى، تستطيع CamelBio توفير أزواج أجسام مضادة موثقة وأجسام مضادة متعددة النسيلة محسنة وكواشف مساعدة بكميات كبيرة ومواد خام لأهداف نادرة. استفد من شبكة الإمداد لدينا لتسريع سير عمل تطوير الفحوصات وأبحاث تخليق البروتين.