جسم مضاد أحادي النسيلة أرنب مضاد لـ DNMT3B لـ WB، وChIP، وELISA - Q9UBC3

مواصفات ومعايير المنتج الأساسية

الخلفية البيولوجية: وظيفة وتوطين DNMT3B

• DNMT3B هو إنزيم ميثيل ترانسفيراز DNA (سيتوسين-5) يحفز ميثلة DNA الجديدة، مما يضع أنماط ميثيل حاسمة للتطور الجنيني والتمايز الخلوي.
• يقوم بميثلة DNA النووي داخل المنطقة الأساسية بشكل تفضيلي وقد ينسق ميثلة DNA مع تعديلات الهيستون لتنظيم بنية الكروماتين والتعبير الجيني.
• توجد أشكال متعددة متغيرة التضفير؛ الأشكال 1 و 3 وربما 2 هي أشكال وظيفية، بينما الأشكال 4 و 5 تفتقر إلى أنماط ميثيل ترانسفيراز المحفوظة ومن المحتمل أن تكون غير نشطة تحفيزيًا.
• بعد دوره التحفيزي، يعمل DNMT3B كمثبط أساسي للنسخ من خلال التفاعل مع CBX4 و ZHX1، مما يتوسط كتم التعبير الجيني بشكل مستقل عن نشاط الميثلة.
• بالاشتراك مع DNMT1 والعامل CTCFL/BORIS، ينظم DNMT3B ثنائي ميثلة الهيستون H3K4 و H3K9 في محفز BAG1، مما يساهم في تنشيط النسخ.
• DNMT3B ضروري لكتم جين DUX4 في الخلايا الجسدية؛ يرتبط اختلال تنظيمه بحثل العضلات الوجهي الكتفي العضدي من النوع 4 (FSHD4). مراجع ذات صلة: PMID:27153398
• يتوطن DNMT3B في النواة، ويعبر عنه على نطاق واسع، بمستويات عالية في كبد الجنين والقلب والكلى والمشيمة، ومستويات أقل في أنسجة البالغين مثل الدماغ والعضلات الهيكلية. الشكل 1 غائب في الدماغ والعضلات الهيكلية وخلايا الدم أحادية النواة.
• تعديلات ما بعد الترجمة، بما في ذلك الفسفرة والسيترولين، قد تؤثر على استقرار ونشاط DNMT3B؛ كما يتم استهدافه بواسطة اقتران يشبه اليوبيكويتين.

إرشادات تجريبية ونصائح تقنية

• يتوافق المستضد المناعي مع الأحماض الأمينية 206-360 من DNMT3B البشري، وهي منطقة تحتوي على جزء من نطاق PWWP؛ تحقق من التعبير عن الأشكال الوظيفية في نظام عينتك لضمان الكشف.
• لطخة ويسترن (WB)، توقع ظهور شريط قريب من 96 كيلو دالتون؛ تحقق من النوعية باستخدام ضوابط إقصاء أو إسكات DNMT3B، حيث قد تهاجر بعض الأشكال بأحجام مختلفة.
• لـ ChIP، قم بتحسين ظروف الربط المتقاطع والتقطيع وتركيز الجسم المضاد بعناية، حيث أن DNMT3B بروتين نووي مرتبط بالكروماتين؛ قم بتضمين مناطق سلبية مناسبة.
• في اختبار ELISA، قم بإنشاء منحنى قياسي باستخدام المستضد المناعي المهجن لتقييم الخطية؛ يمكن أيضًا استخدام الجسم المضاد للالتقاط أو الكشف في اختبار ELISA الساندويتش مع أزواج متطابقة.
• بما أن DNMT3B يعبر عنه بمستويات منخفضة في العديد من الأنسجة، فكر في إثراء النواة أو تحميل بروتين عالي للكشف الحساس.
• لم يتم الإبلاغ عن تفاعل متقاطع مع أنواع غير بشرية؛ تحقق من ذلك في النظام ذي الصلة إذا استخدمت مع عينات غير بشرية.

CamelBio: جسر التوريد الشامل الخاص بك

تمكنك CamelBio من خلال أجسام DNMT3B المضادة الموثوقة والمواد الخام التشخيصية التكميلية في أبحاث التخلق المتعاقب وعلم الأوراق. تقدم منصتنا أزواج أجسام مضادة معتمدة، وأجسام مضادة أحادية ومتعددة النسيلة محسنة، ومواد كيميائية مساعدة بالجملة، وتوريد مواد خام لأهداف نادرة - كل ذلك مدعوم باستشارات تقنية لتطوير مقايسة سلسة من المفهوم إلى التطبيق السريري.