مضاد CLOCK بوليكلونال من أرنب للـ WB و ELISA - O15516

المواصفات والمعلمات الأساسية للمنتج

الخلفية البيولوجية: وظيفة CLOCK وتوطينه

• بروتين CLOCK (Circadian Locomotor Output Cycles Protein Kaput)، المعروف أيضاً باسم bHLHe8، هو مكون أساسي للساعة البيولوجية الجزيئية التي تقود إيقاعات مدتها حوالي 24 ساعة في التعبير الجيني والتمثيل الغذائي والسلوك (UniProt O15516).
• باعتباره الفرع الإيجابي لحلقة التغذية الراجعة للنسخ/الترجمة، يشكل CLOCK ثنائياً غير متجانس مع BMAL1 (أو BMAL2) للارتباط بعناصر E-box (5'-CACGTG-3') في مروجات جينات الساعة الأساسية (PER1/2/3, CRY1/2) والجينات الخاضعة لتحكم الساعة، وبالتالي تنشيط النسخ.
• يفضل الثنائي غير المتجانس CLOCK-BMAL1 التعرف على الموتيف 5'-CACGTGA-3'، حيث يرتبط CLOCK بموقع النصف 5'-CAC-3' ويرتبط BMAL1 بموقع النصف 5'-GTGA-3'؛ كما يتم التعرف على الموتيفات غير القانونية 5'-AACGTGA-3' و 5'-CATGTGA-3'. مراجع ذات صلة: PMID:23229515
• يمتلك CLOCK نشاطاً جوهرياً كأسيتيلtransferase للهيستون، مما يتيح إعادة تشكيل الكروماتين اليومي عن طريق أسيتلة الهيستونات (مثل H3, H4) والبروتينات غير الهيستونية، بما في ذلك BMAL1 نفسه؛ هذه النشاط حاسمة بقدر أهمية النسخ لتوليد الإيقاع.
• يقوم بأسيتلة إنزيم سينسيز الأرجينينوسكسينات 1 (ASS1) بطريقة يومية، مما يؤدي إلى تثبيط النشاط الإنزيمي والتحكم في إيقاع تصنيع الأرجينين وتكوين اليوريا، وبالتالي ربط الساعة البيولوجية بالتمثيل الغذائي. مراجع ذات صلة: PMID:28985504
• يقوم CLOCK بكبت النشاط النسخي لمستقبل الجلوكوكورتيكويد NR3C1/GR عن طريق أسيتلة بقايا لايسين متعددة في المنطقة المفصلية للمستقبل، مما يقلل من ارتباطه بعناصر الاستجابة للجلوكوكورتيكويد. مراجع ذات صلة: PMID:21980503
• على المستوى تحت الخلوي، يوجد CLOCK أساساً في النواة ولكنه يُكتشف أيضاً في السيتوبلازم والسيتوسول. يتم التعبير عنه على نطاق واسع، مع أعلى المستويات في الخصية والعضلة الهيكلية، وهو غني جداً في النواة فوق التصالبية (SCN) في الدماغ، وهي الساعة المركزية.
• تضبط التعديلات ما بعد الترجمة، بما في ذلك الفسفرة والأسيتلة واليبيكويتين، استقرار CLOCK ونشاطه، مما يساهم في التحكم المتذبذب الدقيق لإيقاعات الساعة البيولوجية.

التوجيه التجريبي ونصائح تقنية

• يتطابق المستضد مع الأحماض الأمينية 450-600 من CLOCK البشري، وهي منطقة قد تضمن التعرف على نطاق الأسيتيلtransferase وتساعد في كشف كل من النسخة الكاملة والنسخ المتغيرة المحتملة؛ فكر في التحقق من التفاعل في الأنواع والأنسجة ذات الصلة.
• بالنسبة للتلطيخ المناعي الغربي (Western blot)، الوزن الجزيئي المتوقع لـ CLOCK هو 95 كيلو دالتون؛ ومع ذلك، قد تؤدي التعديلات ما بعد الترجمة (مثل الفسفرة، الأسيتلة) إلى إزاحة النطاق الملاحظ. استخدم محلول الحجب والكواشف المناسبة المحسنة للأجسام المضادة البوليكلونالية من الأرنب.
• بالنسبة لـ ELISA، تأكد من أن طلاء البروتين المعاد التركيب أو الببتيد يتطابق مع منطقة المستضد لتعزيز التقاط الجسم المضاد. قم بتحديد تركيز الجسم المضاد لتحديد تركيز العمل الأمثل في نظام الاختبار الخاص بك.
• تم الإبلاغ عن التفاعل المتقاطع مع الإنسان والفأر والجرذ؛ تحقق من الصحة في كائن النموذج الخاص بك باستخدام ضوابط إيجابية وسلبية. تعبير CLOCK يومي، لذا ضع في الاعتبار وقت الحصاد عند فحص المستويات الداخلية.

CamelBio: جسر التوريد الشامل الخاص بك

تقدم CamelBio محفظة شاملة من المواد الخام لتشخيص المختبر (IVD)، بما في ذلك أجسام مضادة تم التحقق من صحتها ومواد كيميائية مساعدة، لدعم مصنعي التشخيص والمختبرات البحثية من المفهوم إلى العيادة. يعد جسم CLOCK المضاد البوليكلونال الخاص بنا أداة قوية لدراسات بيولوجيا الإيقاع اليومي وتنظيم النسخ، ويمكننا توفير كميات ضخمة، أو أزواج متطابقة من الأجسام المضادة، أو صيغ مخصصة حسب الطلب. سواء كنت بحاجة إلى أجسام مضادة لأهداف نادرة، أو مكونات لمقايسات مناعية محسنة، أو استشارات فنية، فإن CamelBio هي شريكك الموثوق لتسريع تطوير IVD.