جسم مضاد متعدد النسيلات أرانبي ضد CD73/NT5E للتلطييف الغربي (WB)، الهستوكيمياء المناعية paraffin (IHC-P)، التألق المناعي/الكيمياء الخلوية المناعية (IF/ICC)، المقايسة المناعية الإنزيمية (ELISA) - P21589

المواصفات والبارامترات الأساسية للمنتج

الخلفية البيولوجية: وظيفة وموضع تواجد CD73/NT5E

• جين CD73/NT5E يُشفر إنزيم إكتو-5'-نوكليوتيداز، وهو بروتين غشائي مرتبط بالجليكوزيل فوسفاتيديل إينوزيتول (GPI) يحفز تحلل أحاديات فوسفات النيوكليوتيدات خارج الخلية إلى نيوكليوزيدات المقابلة وفوسفاط غير عضوي.
• يحفز تحلل AMP إلى أدينوزين وفوسفاط غير عضوي، ويفضل أحاديات فوسفات الريبونيوكليوتيدات على أشكال ديوكسيريبوز (PubMed:21933152, PubMed:22997138, PubMed:23142347, PubMed:34403084). المراجع ذات الصلة:
• PMID:21933152
• PMID:22997138
• PMID:23142347
• PMID:34403084
• يُظهر تخصصاً رحباً للركائز، بما في ذلك IMP، UMP، GMP، CMP، dAMP، dCMP، dTMP، NAD، و NMN (PubMed:21933152, PubMed:22997138, PubMed:23142347). المراجع ذات الصلة:
• PMID:21933152
• PMID:22997138
• PMID:23142347
• يتمركز في غشاء الخلية عبر مرسى GPI في النهاية C، مما يضع موقع النشاط خارج الخلية لتنظيم الإشارات البورينية والاستجابات المناعية.
• يتطلب الزنك كعامل مساعد للنشاط التحفيزي؛ يحتوي الإنزيم على مركز زنك ثنائي النوى ضروري لتحلل الفوسفات.
• تشمل التعديلات ما بعد الترجمة الارتباط بالجليكان الرابط N وتكوين روابط ثنائية الكبريت، مما يساهم في استقرار البروتين ووظيفته.
ترتبط المتغيرات الجينية في جين NT5E بالتكلس الشرياني الناتج عن نقص CD73 (ACDC)، وهو اضطراب نادر وراثي جسمي متنحي.

إرشادات تجريبية ونصائح تقنية

• يتوافق المستضد المناعي مع بقايا الأحماض الأمينية من 27 إلى 377 لجين NT5E البشري، والذي يغطي غالبية النطاق خارج الخلوي؛ هذا التصميم يفضل كشف CD73 الموجود على سطح الخلية في شكله الأصلي.
• بالنسبة للتلطييف الغربي (WB)، ينصح بنطاق تخفيف من 1:500 إلى 1:2000، مع العلم أن الوزن الجزيئي المتوقع هو ~63 كيلو دالتون؛ في ظل الظروف المختزلة، قد تظهر الأشكال المرتبطة بالجليكان بوزن أعلى قليلاً.
• بالنسبة للهستوكيمياء المناعية (IHC-P) والتألق المناعي (IF/ICC)، غالباً ما يكون استرجاع المستضد باستخدام محلول سترات (الرقم الهيدروجيني 6.0) مفيداً؛ قم بالتحقق من الصلاحية في مجموعة من الأنسجة الضابطة الإيجابية والسالبة.
• تم إثبات التفاعل المتقاطع مع الفأر والجرذ، ولكن نظراً للاختلافات التسلسلية بين الأنواع، يجب تحديد تخفيفات العمل المثالية تجريبياً لكل اختبار.
• بصفته جسماً مضاداً متعدد النسيلات، قد يختلف الاتساق بين الدفعات؛ نوصي بمعايرة كل دفعة جديدة وإدراج الضوابط الإيجابية والسالبة المناسبة في كل تجربة.
• بالنسبة للمقايسة المناعية الإنزيمية (ELISA)، يمكن اختبار الطلاء المباشر للبروتين المؤتلف أو تنسيقات الالتقاط والكشف؛ قم بمعايرة شبكية لتحسين نسبة الإشارة إلى الضوضاء.

CamelBio: جسرك الشامل للمصادر

تدعم CamelBio مصنعي أجهزة التشخيص في المختبر (IVD) ومختبرات الأبحاث بسلسلة إمداد شاملة للمواد الخام عالية الجودة، بما في ذلك أزواج الأجسام المضادة التي تم التحقق من صلاحيتها، والبروتينات المؤتلفة، والكواشف المساعدة. يتناسب الجسم المضاد متعدد النسيلات ضد CD73/NT5E مع خطوط العمل التي تبحث في الإشارات البورينية، واستقلاب الأدينوزين، والتنظيم المناعي. سواء كنت بحاجة إلى كميات كبيرة، اقتران مخصص، أو كنت تواجه صعوبة في الحصول على كواشف مستهدفة نادرة، اتصل بـ CamelBio لمناقشة كيف يمكننا تبسيط عملية الشراء الخاصة بك من المفهوم إلى العيادة.