مضاد أحادي النسيلة أرنبي ضد CD68 لتقنية WB و IF-P و IHC-P و ELISA - P34810

المواصفات والمعلمات الأساسية للمنتج

الخلفية البيولوجية: وظيفة CD68 وموقعه الخلوي

• CD68، المعروف أيضاً باسم الماكروسايالين أو GP110 أو LAMP4 أو SCARD1، هو بروتين غشائي عبر الغشاء من النوع الأول شديد الغليكوزيلاتة ينتمي إلى عائلة البروتينات السكرية الغشائية المرتبطة بالجسيمات الحالة/الجسيمات الداخلية (LAMP). يحتوي على نطاق شبيه بالموسين وفتزيلة عبر الغشاء.
• ينتج عن الربط البديل لجين CD68 أشكال متعددة من الأيزوفورمات، مما قد يساهم في التنوع الوظيفي في أنواع الخلايا المختلفة أو الأجزاء الخلوية المختلفة.
• يلعب CD68 دوراً محورياً في الأنشطة البلعية للبلاعم الأنسجية، ويشارك في كل من عملية الأيض الليزوزومي داخل الخلية وفي التفاعلات الخلوية بين الخلايا والتفاعلات بين الخلية ومسببات الأمراض خارج الخلية. يرتبط بالليكتينات أو السيلكتينات الخاصة بالأنسجة والأعضاء، مما يسهل تمركز فصائل البلاعم في مواقع معينة.
• يخضع البروتين لعملية إعادة تدوير سريعة بين الجسيمات الداخلية والجسيمات الحالة وغشاء الخلية، وهي عملية ديناميكية قد تمكن البلاعم من الزحف فوق الركائز الحاملة للسيلكتين أو الخلايا الأخرى.
• داخل الخلية، يتواجد CD68 بشكل أساسي في غشاء الخلية وغشاء الجسيمات الداخلية وغشاء الجسيمات الحالة، وهو ما يتوافق مع أدواره في النقل الحويصلي والالتصاق السطحي.
• يتم التعبير عن CD68 بكميات عالية في الوحيدات الدموية والبلاعم الأنسجية. كما يوجد بكميات أقل في الخلايا اللمفاوية والألياف الخلوية والخلايا البطانية والعديد من الخطوط الخلوية السرطانية. في الأورام، قد يعزز التعبير عن CD68 الالتصاق بوساطة السيلكتين بالبطانة الوعائية، مما قد يساعد في الانتشار النقلي.
• تشمل التعديلات ما بعد الترجمة غليكوزيلاتة واسعة النطاق مرتبطة بالنيتروجين والأكسجين، وهو ما يفسر أن الوزن الجزيئي الظاهر للبروتين أعلى من القيمة المتوقعة 37 كيلو دالتون في تفاعل SDS-PAGE. يحتوي البروتين أيضاً على روابط ثنائية الكبريت وببتيد إشارة.

إرشادات تجريبية ونصائح تقنية

• المستضد المناعي المستخدم هو ببتيد اصطناعي (الأحماض الأمينية 100-200 من CD68 البشري)، مما يشير إلى أن الجسم المضاد يتعرف على حاتم خطي. بالنسبة للتحليل المناعي المنقول بالويسترن (WB)، يجب أن تكون الظروف القياسية المختزلة والمحيدة للطبيعة مناسبة؛ ومع ذلك، بسبب الغليكوزيلاتة الكثيفة، قد تهاجر الحزمة المرصودة فوق القيمة المتوقعة 37 كيلو دالتون. يُنصح باستخدام إنزيمات إزالة الغليكوزيلاتة لتأكيد النوعية المحددة إذا لزم الأمر.
• بالنسبة للمناعة الفلورية على المقاطع المضمنة بالبارافين (IF-P) والكيمياء المناعية النسيجية (IHC-P)، يُوصى باستعادة المستضد لأن CD68 هو بروتين غشائي يتواجد غالباً في الأجزاء داخل الخلوية. قم بتحسين التثبيت (مثل 4% PFA أو الفورمالين) والنفاذية لضمان الوصول إلى الحاتم في الجسيمات الداخلية/الجسيمات الحالة.
• عند استخدام هذا الجسم المضاد في تقنية ELISA، تحقق من الأداء مقابل بروتين CD68 المؤتلف أو محللات الخلايا من خطوط الخلايا المعبرة عن CD68 (مثل الوحيدات/البلاعم THP-1) لتأكيد الحساسية والنوعية المحددة.
• بما أن CD68 هو علامة للبلاعم، قم بتضمين ضوابط إيجابية مناسبة (مثل محللات البلاعم البشرية) وضوابط سلبية (مثل عينات محذوفة لجين CD68 أو ضوابط النمط النظيري) في جميع التجارب للتحقق من النوعية المحددة للهدف.

CamelBio: جسرك الشامل لتوريد المواد الأولية

تسهل CamelBio عملية شراء المواد الأولية للتشخيص المختبري (IVD) لأبحاث البلاعم وعلامات الأورام، حيث تقدم أضداداً أحادية وعديدة النسيلة مصدقة مثل هذا الاستنساخ المضاد لـ CD68، بالإضافة إلى أزواج ELISA محسنة والكواشف المساعدة. بدعم من نموذج سلسلة إمداد شاملة، نقدم جودة ثابتة وتوافر كميات كبيرة واستشارات تقنية لمساعدة مطوري التشخيص على تسريع انتقالهم من الفكرة إلى التطبيق السريري.