جسم مضاد متعدد النسائل من الأرنب مضاد لـ CD4 للاستخدام في WB وIF/ICC وIF-P وELISA - P01730

المواصفات والمعايير الأساسية للمنتج

الخلفية البيولوجية: وظيفة CD4 وتوضعه

• يُعد CD4 بروتينًا سكريًا متكاملًا في الغشاء بوزن 51 كيلو دالتون، ويُعرف أيضًا باسم مستضد سطح الخلايا التائية T4/Leu-3، وينتمي إلى العائلة الفائقة للغلوبولينات المناعية. ويحتوي على أربعة مجالات شبيهة بالغلوبولين المناعي خارج الخلية (D1–D4)، وحلزون واحد عابر للغشاء، وذيل سيتوبلازمي يتفاعل مع كيناز Src المعروف باسم LCK.
• في الخلايا التائية المساعدة، يعمل CD4 كمستقبل مساعد لجزيئات معقد التوافق النسيجي الرئيسي من الصنف الثاني (MHC II). ويرتبط في الوقت نفسه بمستقبل الخلايا التائية (TCR) وبـ MHC II على الخلايا العارضة للمستضد، مما يؤدي إلى تجنيد LCK لفسفرة ركائز معقد TCR-CD3، وبالتالي بدء سلاسل إشارات تؤدي إلى تنشيط الخلايا التائية وإنتاج اللمفوكينات وتكاثر الخلايا.
• يُعد CD4 ضروريًا لتطور الخلايا التوتية ولتمايز الخلايا التائية المساعدة. كما يحفز نضج الوحيدات إلى بالعات، مما يؤكد دوره في المناعة الفطرية والتكيفية.
• بالإضافة إلى الخلايا التائية، يُعبَّر عن CD4 في البالعات والخلايا المتغصنة والخلايا القاتلة الطبيعية (NK)، حيث ينظم التمايز والتعبير عن السيتوكينات وهجرة الخلايا عبر مسارات مستقلة عن TCR/LCK.
• يعمل CD4 كمستقبل رئيسي لفيروس نقص المناعة البشرية-1 (HIV-1) عبر مجاله D1، مما يسهل دخول الفيروس. كما أنه مستقبل لفيروس الهربس البشري 7 (HHV-7). تؤدي عدوى HIV-1 إلى خفض تنظيم CD4 بواسطة البروتين الفيروسي Vpu. المراجع ذات الصلة: PMID:12089508، PMID:16331979، PMID:2214026، PMID:17346169، PMID:7909607
• يتموضع CD4 بشكل رئيسي في غشاء الخلية، بما يتوافق مع وظيفته كمستقبل سطحي. ويمكن تحرير شكل ذائب منه عند تنشيط الخلايا التائية.
• يُعبَّر عنه بدرجة عالية في الخلايا التائية المساعدة، كما يوجد أيضًا في خلايا مناعية أخرى مثل البالعات والخلايا المتغصنة والخلايا القاتلة الطبيعية (NK). ويُعد تعبير CD4 علامة مميزة للتعرف على الخلايا التائية المساعدة.
• تشمل التعديلات بعد الترجمة الارتباط السكري المرتبط بـ N، وروابط ثنائي الكبريتيد داخل مجالات الغلوبولين المناعي، والتمَيِّل في الذيل السيتوبلازمي، مما قد ينظم توضعه في المجالات الدقيقة للغشاء والإشارات.

الإرشادات التجريبية والنصائح التقنية

• يمتد المستضد المناعي عبر المجال خارج الخلوي (aa 26‑200) من CD4 البشري، ويغطي مواقع ارتباط MHC II وgp120 الخاص بـ HIV-1. وقد يتيح هذا التصميم الكشف عن CD4 كامل الطول في لطخات ويسترن المفككة، وكذلك عن البنى الطبيعية في التألق المناعي وELISA.
• في لطخة ويسترن، يُتوقع ظهور حزمة بالقرب من 51 كيلو دالتون في ظروف الاختزال. وقد يؤدي الارتباط السكري إلى ظهور الوزن الجزيئي الظاهري أعلى من ذلك (55–60 كيلو دالتون). أدرج ضوابط إيجابية مناسبة (مثل محللات Jurkat أو PBMC البشري) وفكر في استخدام عامل اختزال.
• ينبغي التحقق من التفاعل التصالبي المُبلغ عنه مع CD4 لدى الفأر والجرذ في نماذجك التجريبية المحددة. ويُظهر توافق التسلسلات هوية تقارب 70% في المنطقة خارج الخلوية؛ لذلك يُوصى بمعايرة الجسم المضاد الأولي وإجراء تحقق دقيق.
• يمكن استخدام الجسم المضاد في تنسيقات التألق المناعي غير المباشر (IF/ICC) وELISA. احرص على اتباع بروتوكولات التثبيت والنفاذية المناسبة للتألق المناعي؛ ولصبغ سطح الخلية، تجنب إجراء النفاذية. تحقق من صلاحيته في نوع الخلية أو النسيج ذي الصلة.
• عند استخدامه في الدراسات الوظيفية (مثل تثبيط ارتباط HIV-1)، لاحظ أن الطبيعة متعددة النسائل قد تؤدي إلى نتائج متباينة؛ وقد تكون الصيغ وحيدة النسيلة مفضلة للحصول على تثبيط ثابت ومحدد للحاتمة.

CamelBio: جسر التوريد الشامل من محطة واحدة

تُزوّد CamelBio مصنّعي التشخيص والمختبرات البحثية والمعاهد بسلسلة توريد شاملة من محطة واحدة للمواد الخام المستخدمة في التشخيص المختبري (IVD). ولتطوير الاختبارات المناعية المرتبطة بـ CD4—سواء لتنميط الخلايا التائية أو أبحاث HIV أو مراقبة المناعة—نوفر أزواجًا من الأجسام المضادة تم التحقق منها، وأجسامًا مضادة وحيدة النسيلة/متعددة النسائل محسّنة، وكواشف مساندة بكميات كبيرة. ويمكن لخبرتنا في التوريد تسريع مشروعك من الفكرة إلى العيادة، بما في ذلك الحصول على المواد الخام ذات الأهداف النادرة والاستشارات التقنية.