الجسم المضاد وحيد النسيلة المضاد لـ CD4 والمخصص لقياس التدفق الخلوي - P01730

المواصفات والمعلمات الأساسية للمنتج

الخلفية البيولوجية: وظيفة CD4 وتوطينه

• يُعد CD4 بروتينًا سكريًا عابرًا للغشاء وعضوًا في عائلة الغلوبولينات المناعية الفائقة، ويتكون من منطقة خارج خلوية تضم أربعة نطاقات شبيهة بالغلوبولين المناعي (D1–D4)، وحلزون واحد عابر للغشاء، وذيل سيتوبلازمي قصير. ويُعبَّر عنه بشكل أساسي على سطح الخلايا التائية المساعدة، وكذلك على الوحيدات والضامة والخلايا المتغصنة والخلايا القاتلة الطبيعية.
• يعمل CD4 في الخلايا التائية المساعدة كمستقبل مساعد لجزيئات معقد التوافق النسيجي الرئيسي من الصنف الثاني (MHC II). ويرتبط بالمناطق غير متعددة الأشكال من MHC II على الخلايا المقدمة للمستضد، مما يثبت التفاعل بين مستقبل الخلية التائية (TCR) ومعقدات الببتيد وMHC، وهو أمر ضروري للتعرف على المستضد وتنشيط الخلايا التائية.
• عند ارتباط TCR، يستقطب CD4 كيناز عائلة Src ‏LCK عبر ذيله السيتوبلازمي إلى جوار معقد TCR-CD3. ويقوم LCK بفسفرة محفزات التنشيط المعتمدة على التيروزين في مستقبلات المناعة (ITAMs) الموجودة على سلاسل CD3، مما يطلق سلاسل من الإشارات داخل الخلية تؤدي إلى تكاثر الخلايا التائية وإنتاج السيتوكينات وتمايز الخلايا.
• بالإضافة إلى دوره في المناعة التكيفية، يعمل CD4 كمستقبل أساسي لفيروس نقص المناعة البشرية من النوع 1 (HIV-1) من خلال التفاعل مع البروتين السكري gp120 الموجود في الغلاف الفيروسي. كما يعمل كمستقبل لفيروس الهربس البشري 7 (HHV-7). وتعمل بروتينا Vpu وNef في HIV-1 على خفض التعبير السطحي لـ CD4 لتسهيل خروج الفيروس والتملص المناعي. المراجع ذات الصلة: PMID:12089508 PMID:16331979 PMID:2214026 PMID:17346169 PMID:7909607
• يخضع CD4 لتعديلات ما بعد الترجمة، تشمل الغلكزة المرتبطة بـ N، وتكوين الروابط ثنائية الكبريتيد، والبالميتلة عند سيستئين مجاور للغشاء، والفسفرة بواسطة LCK. وتنظم هذه التعديلات طي البروتين وتوطينه الغشائي ونقل الإشارة.
• يُعد التعبير عن CD4 سمة مميزة للخلايا التائية المساعدة، ويُستخدم عادةً كواسم مناعي ظاهري لتحديد مجموعات الخلايا التائية. وقد تختلف كثافته السطحية وفقًا لحالة تنشيط الخلية وتمايزها.
• يمكن أن يؤدي ارتباط CD4 في الضامة والخلايا القاتلة الطبيعية إلى تحفيز التمايز والتعبير عن السيتوكينات وهجرة الخلايا عبر مسارات مستقلة عن TCR/LCK، مما يبرز تعدد وظائفه بما يتجاوز إشارات الخلايا التائية.

الإرشادات التجريبية والنصائح التقنية

• هذا الجسم المضاد مقترن مباشرةً بـ ، وهو فلوروفور ساطع ومستقر ضوئيًا يصدر في نطاق الأحمر البعيد، وجاهز للاستخدام في قياس التدفق الخلوي. عاير الجسم المضاد لتحديد تركيز التلوين الأمثل لنوع الخلايا وظروف التجربة الخاصة بك (النطاق المعتاد: 0.1–1 ميكروغرام لكل 1×10^6 خلية).
• نظرًا إلى ارتفاع التعبير السطحي لـ CD4 على الخلايا التائية المساعدة في حالة الراحة، يجب تضمين ضوابط النظير المناسبة والتمييز بين الخلايا الحية والميتة لضمان التلوين النوعي. وفي اللوحات متعددة الألوان، ادمجه مع الأجسام المضادة المضادة لـ CD3 وCD8 لتحليل مجموعات الخلايا التائية بالتفصيل.
• يتفاعل الجسم المضاد تفاعلاً متبادلاً مع CD4 البشري وCD4 لدى قرد السينومولغوس، مما يجعله مناسبًا للدراسات التي تشمل نماذج الرئيسيات غير البشرية. تحقّق من صلاحية الجسم المضاد في مصفوفة عينتك الخاصة وبروتوكول التثبيت/النفاذية إذا كان التلوين داخل الخلايا مطلوبًا.
• المستضد المناعي هو CD4 بشري مؤتلف، ومن المرجح أن يتوافق مع المجال خارج الخلوي. لذلك، قد يتعرف الجسم المضاد بشكل تفضيلي على CD4 الأصلي غير الممسوخ؛ وقد تتطلب الظروف الممسوخة (مثل اللطخة الغربية في ظل ظروف الاختزال) إجراء تحقق.
• بالنسبة إلى التطبيقات التي تتجاوز قياس التدفق الخلوي، مثل الكيمياء المناعية النسيجية أو الترسيب المناعي، يُوصى بإجراء التحسين والتحقق المستقل بسبب عدم توفر بيانات من الشركة المصنعة.

CamelBio: جسر التوريد الشامل المتكامل

تمكّن CamelBio مصنّعي التشخيص والمختبرات البحثية من خلال توفير مجموعة شاملة من المواد الخام للتشخيص المختبري (IVD)، بما في ذلك الأجسام المضادة المُثبتة الصلاحية وأزواج المستضدات والكواشف المساعدة. يدعم هذا الجسم المضاد لـ CD4 التنميط المناعي للخلايا التائية والأبحاث المتعلقة بفيروس نقص المناعة البشرية، كما أن تفاعله المثبت في العينات البشرية وعينات قرد السينومولغوس يجعله مناسبًا لتطوير الاختبارات المناعية الانتقالية. وبالإضافة إلى الكواشف الفردية، تسهّل CamelBio توريد المواد الخام ذات الأهداف النادرة والطلبات المخصصة بالجملة، مما يساعدك على تبسيط سير عملك بالكامل بدءًا من تصميم الاختبار وحتى التحقق السريري.