مضاد وحيد النسيلة للأرنب Anti-CD117/c-Kit للترسيل الغربي (WB)، وتدفق الخلايا (FC)، ومقايسة ELISA - P05532

المواصفات والمعلمات الأساسية للمنتج

الخلفية البيولوجية: وظيفة وتوطين CD117/c-Kit

• CD117/c-Kit هو مستقبلات كيناز بروتين التيروسين عبر الغشاء أحادي المرور يرتبط تحديداً بعامل الخلايا الجذعية (KITLG/SCF).
• يلعب دوراً تنظيمياً رئيسياً في تكوين الدم، وصيانة الخلايا الجذعية، وتكوين الأمشاج، وتطور الخلايا البدينة، وتكوين الميلانين.
• عند ارتباط الرابط، ينشط KIT مسارات داخل خلوية متعددة، بما في ذلك مسارات PI3K/AKT، و RAS/MAPK، و JAK/STAT، مما يحكم بقاء الخلية وتكاثرها وتمايزها.
• تتمركز المستقبلات أساساً في غشاء الخلية، لكن KIT المنشط يخضع لالتهام داخلي سريع إلى السيتوبلازم لتقليل الإشارة أو تدهورها.
• ينتج التوصيل البديل عدة أشكال نظيرة (isoforms)؛ يتم التعبير عن الشكل النظير 3 بشكل أساسي في الخلايا الجذعية المكونة للدم والخلايا الجرثومية بعد الانقسام الاختزالي، بينما توجد الأشكال النظيرة 1 و 2 في مراحل تكوين الحيوانات المنوية المبكرة ونخاع العظام.
• تشمل التعديلات ما بعد الترجمة الفسفرة المستحثة بالرابط، والسكريات المرتبطة بـ N، واليبيكويتين، والتي تقوم بضبط مخرجات الإشارة وتداول المستقبل بدقة.
• يصنف كجين ورمي منشأ (proto-oncogene)، وترتبط طفرات اكتساب الوظيفة في KIT بالأورام الليفية العضلية المعدية المعوية، وفرط تنسج الخلايا البدينة، وغيرها من الأورام الخبيثة.

التوجيه التجريبي ونصائح تقنية

• للترسيل الغربي (Western blotting)، توقع نطاقاً رئيسياً عند حوالي 109 كيلو دالتون يتوافق مع المستقبل بطول كامل؛ قد يتم اكتشاف أيضاً جزء معالج بحجم ~22 كيلو دالتون اعتماداً على نوع الخلية وشروط التحلل.
• بما أن المستضد يغطي جزءاً كبيراً من النطاق خارج الخلية، فإن هذا الجسم المضاد مناسب تماماً للكشف عن CD117 السطوي بواسطة قياس التدفق الخلوي (flow cytometry) على خلايا الفأر الحية غير المنفذة.
• يجب تحسين أداء مقايسة ELISA بتنسيق التقاط مناسب؛ فكر في إقرانه بجسم مضاد كاشف يرتبط بموقع بؤري مختلف لتجنب المنافسة.
• تحقق من خصوصية الجسم المضاد باستخدام تحكم إيجابي معروف (مثل خلايا نخاع عظام الفأر، وخطوط الخلايا البدينة) وتحكم سلبي يكون فيه التعبير عن CD117 غائباً أو تم إيقافه (knocked down).

كاميل بايو (CamelBio): جسر التوريد الشامل الخاص بك

تمكن كاميل بايو (CamelBio) مصنعي التشخيص والباحثين من سلسلة توريد سلسة للمواد الخام لتشخيصات المختبر (IVD). تتضمن محفظتنا أزواجاً من الأجسام المضادة لـ Anti-CD117/c-Kit تم التحقق منها، وأجساماً مضادة وحيدة النسيلة محسنة، ومواد كيميائية مساعدة بالجملة لدعم تطوير مقايسات الخلايا الجذعية والأورام لديك. من توريد الأهداف النادرة إلى الإنتاج القابل للتوسع، تربط كاميل بايو (CamelBio) مشروعك من المفهوم إلى العيادة.