مضاد كاثيبسين L/V/K/H أحادي النسيلة من الأرنب لـ WB، IHC-P، ELISA - P07711/O60911/P43235/P09668

المواصفات والمعايير الأساسية للمنتج

الخلفية البيولوجية: وظيفة كاثيبسين L وتوطينه

• بروكاثيبسين L (Cathepsin L1)، المعروف أيضاً باسم البروتين المفرز الرئيسي (MEP)، هو بروتياز سيستين ليسوسومي مشفر بواسطة جين CTSL. ينتمي إلى عائلة الببتيداز C1 ويشارك تشابهاً عالياً مع كاثيبسين V و K و H.
• بصفته بروتياز ثيولي، يعد كاثيبسين L ضرورياً لدوران البروتين العام داخل الليسوسومات. يشارك في عمليات متنوعة بما في ذلك معالجة المستضدات في الخلايا الظهارية للغدة الزعترية، وإعادة تشكيل العظام، والإطلاق البروتيني لهرمون الغدة الدرقية ثيروكسين من الغلوبيولين الدرقي.
• يحلل كاثيبسين L الإيلاستين عند درجة الحموضة المحايدة ويتراكم في الفراغ خارج الخلوي للخلايا المقدمة للمستضد، مما يساهم في إعادة تشكيل المصفوفة خارج الخلوية أثناء الالتهاب. كما يولد مثبط تكوين الأوعية الدموية إندوستاتين من الكولاجين XVIII. المراجع ذات الصلة: PMID:10716919
• في الخلايا التي تفتقر إلى TMPRSS2، يسهل كاثيبسين L دخول SARS-CoV و SARS-CoV-2 وفيروسات كورونا الأخرى عن طريق تقطيع بروتينات السبايك داخل الليسوسومات، مما يمكن من اندماج الغشاء. المراجع ذات الصلة: PMID:16339146
  PMID:18562523
  PMID:32142651
  PMID:16081529
  PMID:26953343
• يؤدي بدء الترجمة البديل إلى إنتاج أشكال نظيرة تفتقر إلى الببتيد الإشاري، والتي تتوطن في النواة وتقطع عامل النسخ CUX1، وبالتالي تعدل تقدم دورة الخلية. المراجع ذات الصلة: PMID:15099520
• يتوطن كاثيبسين L بشكل أساسي في الليسوسومات، ولكن يمكن أيضاً العثور عليه في غشاء الخلية القمي، وفي الحويصلات الإفرازية (مثل حبيبات الكرومافين)، وفي الفراغ خارج الخلوي، وفي النواة في ظل ظروف معينة.
• تشمل التعديلات ما بعد الترجمة الرئيسية السكرية وتكوين روابط ثنائي الكبريتيد. يتم تصنيع الإنزيم كزيموجين غير نشط (بروكاثيبسين L) ويتم تنشيطه عن طريق التقطع البروتيني. تهاجر شكلته الناضجة عند حوالي 38 كيلو دالتون على SDS-PAGE، بينما يكون السلائف كامل الطول حوالي 37.6 كيلو دالتون.

التوجيه التجريبي ونصائح تقنية

• المستضد هو ببتيد تركيبي من المنطقة المحفوظة (aa 50–150) لكاثيبسين L البشري، مما يفسر على الأرجح التفاعل المتصالب مع كاثيبسين V و K و H. عند تفسير النتائج، ضع في الاعتبار احتمال اكتشاف أعضاء متعددين في العائلة.
• للوتسترن (Western blotting)، من المتوقع ظهور حزمة قرب 38 كيلو دالتون في ظروف اختزالية. لاحظ أن بروكاثيبسين L (~37.5 كيلو دالتون) وأشكاله المعالجة قد تكون مرئية أيضاً اعتماداً على تحضير العينة والسياق الخلوي.
• في المناعة النسيجية (IHC-P)، قد تكون هناك حاجة إلى طرق استرجاع المستضد لكشف العناصر المحددة في الأنسجة المثبتة بالفورمالين. يوصى بتحسين ظروف الاسترجاع (مثل مخزون السترات مقابل EDTA، ودرجة الحموضة، والتسخين).
• ل ELISA، قد يكون هذا المضاد مناسباً ككاشف أو عامل اكتشاف. تحقق من الصحة في مصفوفة العينة المناسبة (مثل مستخلصات الخلايا، أو مستخلصات الأنسجة، أو السوائل البيولوجية) وتأكد من النوعية باستخدام ضوابط البروتين المؤتلف.
• نظراً لتعبيره في مجموعة واسعة من الأنسجة وأنواع الخلايا، بما في ذلك الخلايا المناعية والظهارة، قم بتضمين ضوابط إيجابية وسلبية مناسبة. للدراسات التي تتضمن دخول الفيروسات، لاحظ أن كاثيبسين L يعمل في الأجزاء الحمضية؛ يمكن استخدام مثبطات مثل لوبيبتين أو E-64 لتأكيد النوعية.

CamelBio: جسر التوريد الشامل الخاص بك

يدعم CamelBio مطوري التشخيص والمختبرات البحثية بمحفظة شاملة من المواد الخام لتشخيصات المختبر (IVD)، بما في ذلك أزواج الأضداد التي تم التحقق منها، والأضداد أحادية ومتعددة النسيلة المحسنة، والمواد الكيميائية المساعدة بالجملة. يمثل هذا المضاد لكاثيبسين L/V/K/H نوع المواد الكيميائية عالية الجودة المستهدفة للبروتياز التي يمكننا توريدها للتطبيقات في بيولوجيا الليسوسومات، وأبحاث الأمراض المعدية، وتطوير اختبارات المؤشرات الحيوية. من خلال منصتنا الشاملة، نساعدك في تأمين المواد الخام للأهداف النادرة وتسريع انتقالك من المفهوم إلى التطبيق السريري.