جسم مضاد متعدد النسائل من الأرنب مضاد لـ ATG4D للاستخدام في WB وIF/ICC وELISA - Q86TL0

المواصفات والمعايير الأساسية للمنتج

الخلفية البيولوجية: وظيفة ATG4D وتوزّعه الخلوي

• ATG4D هو بروتياز سيستيني يؤدي دورًا رئيسيًا في الالتهام الذاتي من خلال التوسط في كلٍّ من التنشيط التحللي للبروتينات ونزع الدهون من بروتينات عائلة ATG8. ويشطر الحمض الأميني الطرفي الكربوكسيلي لـ MAP1LC3 وGABARAPL2 لكشف بقايا غليسين أساسية للارتباط بالفوسفاتيديل إيثانول أمين (PE) والإدخال في الغشاء. المراجع ذات الصلة: PMID:21177865
• بالإضافة إلى التنشيط التحللي للبروتينات، يحفّز ATG4D نزع الدهون من بروتينات ATG8 المرتبطة بـ PE أثناء الالتهام الذاتي الكبير، ومن بروتينات ATG8 المرتبطة بالفوسفاتيديل سيرين (PS) في الالتهام الذاتي غير التقليدي، ويعمل بوصفه إنزيم نزع الدهون الرئيسي بين أفراد عائلة ATG4. المراجع ذات الصلة: PMID:29458288، PMID:33909989
• يشارك ATG4D في نمو البلعمة الذاتية الأولية أثناء الالتهام الذاتي للميتوكوندريا بشكل مستقل عن نشاطه البروتيازي، وذلك من خلال تنظيم نقل ATG9A إلى الميتوكوندريا وتعزيز تلامسات البلعمة الذاتية الأولية مع الشبكة الإندوبلازمية أثناء نقل الدهون. المراجع ذات الصلة: PMID:33773106
• يعمل البروتين كمنظّم للالتهام الذاتي يربط بين خلل وظيفة الميتوكوندريا والاستماتة؛ إذ يؤثر استيراده إلى الميتوكوندريا أثناء الإجهاد الخلوي والتمايز في فسيولوجيا الميتوكوندريا، ومستويات أنواع الأكسجين التفاعلية (ROS)، والالتهام الذاتي للميتوكوندريا، وحيوية الخلايا.
• على المستوى تحت الخلوي، يتموضع ATG4D في السيتوبلازم ومصفوفة الميتوكوندريا، بما يتوافق مع أدواره المزدوجة في الالتهام الذاتي وتنظيم الميتوكوندريا.
• يُعبَّر عنه على نطاق واسع، مع تعبير ملحوظ في الخصية، ويخضع للتضفير البديل. وتشمل التعديلات التالية للترجمة الفسفرة.

الإرشادات التجريبية والنصائح التقنية

• يناظر المستضد المناعي المنطقة الطرفية الأمينية (الأحماض الأمينية 1-230) من ATG4D البشري. عند العمل على العينات، ينبغي مراعاة أن هذه المنطقة قد تكون محفوظة بين المتشابهات أو الأنواع، والتحقق من أنماط الحزم وفقًا لذلك.
• بالنسبة إلى لطخة ويسترن (WB)، يبلغ الوزن الجزيئي المتوقع نحو 53 كيلو دالتون، لكن ATG4D الداخلي قد يخضع للمعالجة التحللية أو التعديل؛ لذا ينبغي التحقق من أحجام الحزم باستخدام ضوابط إيجابية مناسبة ومستخلصات من خلايا بشرية أو خلايا فأر.
• في التألق المناعي/الكيمياء الخلوية المناعية (IF/ICC)، يجب تقييم أنماط التلوين السيتوبلازمية والميتوكوندرية. وقد تكون هناك حاجة إلى تحسين ظروف التثبيت والنفاذية للكشف عن ATG4D المتموضع في الميتوكوندريا.
• بالنسبة إلى تطبيقات ELISA، يمكن استخدام الجسم المضاد للكشف عن ATG4D المؤتلف أو الداخلي؛ ويجب إنشاء منحنيات معيارية باستخدام تراكيز معروفة من المستضد، مع مراعاة التفاعل المتصالب مع أفراد عائلة ATG4 ذوي الصلة عند إجراء التحليل المتعدد.

CamelBio: جسر التوريد الشامل الخاص بك

توفر CamelBio لمصنّعي التشخيص والمختبرات ومعاهد الأبحاث وصولًا شاملًا إلى المواد الخام للتشخيص المختبري (IVD)، والخدمات التقنية، والاستشارات، بما يغطي كل مرحلة من الفكرة إلى العيادة. تشمل محفظتنا أزواج الأجسام المضادة التي تم التحقق من صلاحيتها، والأجسام المضادة وحيدة النسيلة/متعددة النسائل المحسّنة مثل هذا الجسم المضاد متعدد النسائل ATG4D، والكواشف المساعدة بكميات كبيرة، وتوريد المواد الخام النادرة الخاصة بالأهداف. ويمكن للباحثين الذين يركزون على مسارات الالتهام الذاتي والميتوكوندريا الاعتماد على CamelBio للحصول على دعم شامل في المشتريات وإمداد موثوق.