مضاد ASMT بوليكلونال أرنب للـ WB، IHC-P، ELISA - P46597

المواصفات والمعايير الأساسية للمنتج

الخلفية البيولوجية: وظيفة ASMT وتوطينه

• إنزيم ASMT (أسيتيلسيروتونين O-ميثيلtransferase)، المعروف أيضاً باسم هيدروكسي إندول O-ميثيلtransferase (HIOMT)، هو الإنزيم الرئيسي الذي يحفز الخطوة الأخيرة في التخليق الحيوي للميلاتونين: نقل مجموعة ميثيل من S-أدينوزيل-إل-ميثيونين إلى N-أسيتيلسيروتونين لإنتاج الميلاتونين (N-أسيتيل-5-ميثوكسي تريبتامين).
• يخضع جين ASMT للتوصيل البديل (alternative splicing)، مما يؤدي إلى متغيرات نسخ متعددة تشفر أشكالاً بروتينية متباينة (isoforms).
• على مستوى البروتين، يُعبر عن ASMT بشكل رئيسي في الغدة الصنوبرية، حيث يلعب دوراً حاسماً في تنظيم الإيقاعات اليومية والتكاثر الموسمي عبر إفراز الميلاتونين.
• في الشبكية، تم اكتشاف تعبير منخفض جداً لـ mRNA، لكن بروتين ASMT غائب، مما يشير إلى تنظيم خاص بالأنسجة لهذا الإنزيم. المراجع ذات الصلة: PMID:7989373 PMID:8574683
• ينتمي ASMT إلى عائلة الميثيلtransferases الفائقة ويتطلب S-أدينوزيل-إل-ميثيونين كمانح ميثيل لنشاطه المحفز.
• يتم توضيح البروتين تحت أيض الدهون، مما يسلط الضوء على رابط محتمل بين تخليق الميلاتونين والمسارات الأيضية الأوسع.
• كشفت الدراسات الهيكلية (مدعومة بتوضيحات الهيكل ثلاثي الأبعاد) عن بنية الموقع النشط للإنزيم، مما يسهل البحث في آليته المحفزة وتصميم المثبطات.
• أكد علم البروتيوميات القائم على مطياف الكتلة تعبير ASMT في الغدة الصنوبرية، مما يدعم فائدته كعلامة حيوية لوظيفة الغدة الصنوبرية.

التوجيه التجريبي ونصائح تقنية

• المستضد المستخدم هو بروتين اندماجي معاد التركيب يغطي الأحماض الأمينية 1-298 من ASMT البشري (NP_001164510.1). من المرجح أن يولد هذا التسلسل شبه الكامل أجساماً مضادة تتعرف على عدة epitopes خطية، مما يجعله مناسباً للكشف عن البروتين الم-denatured في التلطيخ المناعي (Western blot).
• بالنسبة لـ IHC-P، فكر في تحسين ظروف استرجاع المستضد وتخفيف الجسم المضاد، حيث قد تظهر الأجسام المضادة البوليكلونالية خلفية أعلى في الأنسجة المثبتة بالفورمالديهايد والمضمنة في البارافين.
• في ELISA، يمكن للجسم المضاد كشف ASMT المعاد التركيب أو الأصلي؛ ومع ذلك، يجب التحقق من التفاعل المتقاطع مع ميثيلtransferases أخرى، خاصة عند اختبار عينات من أنواع ذات تشابه تسلسلي عالٍ.
• عند استخدام هذا الجسم المضاد في أنسجة الفأر أو الجرذ، تأكد من التفاعل المتقاطع من خلال محاذاة التسلسل أو التتر المبدئي، نظراً لأن المستضد مشتق من الإنسان.
• بالنسبة لـ WB، توقع نطاقاً (band) عند حوالي 38 kDa؛ قد تظهر نطاقات إضافية من الأشكال المتباينة أو التعديلات ما بعد الترجمة ويجب التحقق منها باستخدام ضوابط مناسبة.

CamelBio: جسر التوريد الخاص بك في نقطة واحدة

تتعاون CamelBio مع مصنعي التشخيص والمختبرات البحثية لتبسيط procurement المواد الخام لتشخيصات المختبر (IVD)، من تحديد المركبات الرائدة إلى الترجمة السريرية. لأبحاث تخليق الميلاتونين والإيقاع اليومي، نحن نقدم أزواجاً من الأجسام المضادة الموثقة، وبروتينات معادة التركيب، ومواد كيميائية مساعدة لتسريع تطوير المقايسات. اتصل بفريقنا للحصول على التسعير بالجملة، والتركيبات المخصصة، ودعم توريد المواد الخام للأهداف النادرة.