مضاد AKT1S1/PRAS40 متعدد النسيلة من الأرنب لـ WB، IHC-P، IF/ICC، ELISA - Q96B36

المواصفات والمعايير الأساسية للمنتج

الخلفية البيولوجية: وظيفة AKT1S1/PRAS40 وتوطينه

• AKT1S1/PRAS40 (ركيزة AKT1 الغنية بالبرولين 1) يُعرف أيضاً باسم ركيزة AKT الغنية بالبرولين 40 كيلو دالتون (PRAS40) ويتم ترميزه بواسطة جين AKT1S1، منتجاً بروتيناً بحجم ~27 كيلو دالتون (UniProt: Q96B36)؛ التوصيل البديل (Alternative splicing) يولد متغيرات نسخ متعددة.
• يعمل كمنظم سلبي لـ mTORC1، مما يثبط نشاط الكيناز عن طريق احتلال موقع تجنيد ركيزة MTOR (PubMed:17277771, PubMed:17386266, PubMed:17510057, PubMed:29236692).
  مراجع ذات صلة: PMID:17277771, PMID:17386266, PMID:17510057, PMID:29236692
• عند التحفيز بالأنسولين أو المغذيات، يصبح AKT1S1 فائقاً الفسفرة (hyperphosphorylated) وينفصل عن mTORC1، مما يرفع التثبيط ويسمح بإشارات mTORC1 بالمضي قدماً (PubMed:17386266, PubMed:18372248).
  مراجع ذات صلة: PMID:17386266, PMID:18372248
• وظيفة AKT1S1 التثبيطية تنظم نفسها عن طريق الفسفرة والارتباط اللاحق ببروتينات 14-3-3، مما يعزز انفصاله عن المعقد (PubMed:16174443, PubMed:18372248).
  مراجع ذات صلة: PMID:16174443, PMID:18372248
• يتوطن البروتين في المقام الأول في السيتوبلازم/سيتوسول، بما يتوافق مع دوره في تعديل نشاط mTORC1 في مواقع الجسيمات الحالية (lysosomal) والسيتوسول.
• يُعبر عن AKT1S1 على نطاق واسع عبر الأنسجة، مع أعلى مستويات في الكبد والقلب؛ وغالباً ما تكون مستويات التعبير مرتفعة في خطوط الخلايا السرطانية (مثل A-549، HeLa) مقارنة بخطوط الخلايا الطبيعية.
• تشمل التعديلات ما بعد الترجمة الفسفرة في بقايا السيرين/ثريونين متعددة والميثيل؛ وتؤثر هذه الأحداث على نشاطه وتفاعلاته.

إرشادات تجريبية ونصائح تقنية

• المستضد (ببتيد اصطناعي، aa 150-256) يستهدف منطقة مركزية من AKT1S1 البشري؛ تأكد من أن عينتك تعبر عن البروتين كامل الطول أو الأشكال النظيرة التي تحتوي على هذا المحدد (epitope) لتجنب النتائج السلبية الكاذبة.
• للوتيرن بلوت (Western blotting)، يهاجر AKT1S1 عند حوالي 27 كيلو دالتون؛ فكر في استخدام تحكم إيجابي مثل مستخلص HeLa أو A-549، وتحقق من خصوصية النطاق باستخدام الببتيدات المسدودة (blocking peptides) أو siRNA إذا لزم الأمر.
• في IHC-P و IF/ICC، لاحظ التوطين السيتوبلازمي لـ AKT1S1؛ قد يكون هناك حاجة للاختراق (permeabilization) واسترجاع المستضد للحصول على الكشف الأمثل.
• تم الإبلاغ عن أن هذا الجسم المضاد مناسب لـ ELISA؛ قم بإجراء تترات الشطرنج (checkerboard titrations) لتحديد ظروف التغليف والكشف المثلى لإعداد الاختبار الخاص بك.

CamelBio: جسر التوريد الخاص بك في مكان واحد

يعمل CamelBio كشريك شامل للمواد الخام لتشخيصات المختبر (IVD)، حيث يقدم هذا الجسم المضاد ضد AKT1S1/PRAS40 جنبًا إلى جنب مع مجموعة واسعة من الكواشف الم validated لأبحاث إشارات mTOR وعلم الأورام. توفر سلسلة التوريد المتكاملة لدينا لمصنعي الأجهزة التشخيصية والمختبرات أجساماً مضادة بالجملة، وكواشف مساعدة، ودعماً لتوريد الأهداف النادرة لتسريع التطوير من المفهوم إلى العيادة. اتصل بنا لمناقشة حلول الشراء المخصصة المصممة لتلبية احتياجات مشروعك.