الجسم المضاد متعدد النسيلة المضاد لـ AKT1 لـ WB و IF/ICC و IHC-P و ELISA - P31749

المواصفات والمعلمات الأساسية للمنتج

الخلفية البيولوجية: وظيفة AKT1 وموقعه الخلوي

• AKT1 هو كيناز بروتيني سيرين/ثريونين، يعرف أيضاً باسم كيناز البروتين B (PKB)، وينتمي إلى عائلة كينازات AKT (AKT1 و AKT2 و AKT3). وهو ينظم عمليات متنوعة تشمل التمثيل الغذائي والتكاثر وبقاء الخلايا والنمو وتكوين الأوعية الدموية. المراجع ذات الصلة: PMID:11882383 PMID:15526160 PMID:15861136
• يتوسط AKT1 تأثيرات عوامل النمو مثل الأنسولين و IGF-1 و EGF في اتجاه مجرى مسار PI3K، ويتحكم في امتصاص الجلوكوز عبر انتقال GLUT4 وتخليق الجليكوجين عن طريق تثبيط GSK3. المراجع ذات الصلة: PMID:11994271
• يعزز بقاء الخلايا عن طريق الفسفرة وتثبيط العوامل المُحفزة لموت الخلايا المبرمج مثل BAD و MAP3K5، وعن طريق تنشيط مسارات البقاء بما في ذلك NF-κB و CREB1. المراجع ذات الصلة: PMID:11154276 PMID:9829964
• يقع AKT1 في السيتوبلازم والنواة وغشاء الخلية والفضاء بين الأغشية في الميتوكوندريا، مما يعكس مشاركته في عدة حجرات إشارات خلوية.
• يخضع AKT1 لتعديلات بعد الترجمة الرئيسية مثل الفسفرة والأستلة، ويعتبر جينًا ورميًا أوليًا. غالبًا ما يزداد التعبير عنه في السرطانات، حيث يزداد الشكل المفسفر عند التيروزين 176 أثناء تطور سرطان الثدي.
• يتم التعبير عن AKT1 في كل مكان في الخلايا البشرية، ويلعب دورًا حاسمًا في النمو الخلوي والتمايز. يلاحظ ارتفاع التعبير الخاص بالأنسجة في الأورام الخبيثة البروستاتية والثديية.

إرشادات تجريبية ونصائح تقنية

• المستضد المناعي يتوافق مع ببتيد داخل منطقة الطرف الكربوني (الأحماض الأمينية 350–480) من AKT1 البشري، مما قد يمنحه خصوصية للأشكال الإسوية؛ ومع ذلك، تحقق من صحته باستخدام البروتينات المؤتلفة أو siRNA إذا كان التفاعل المتبادل مع AKT2 أو AKT3 يثير قلقًا.
• بالنسبة للترحيل الغربي (Western blotting)، تكشف الظروف المنزوعة للطبيعة والمختزلة عادةً عن حزمة عند ~56 كيلو دالتون. استخدم ضوابط إيجابية مناسبة (مثل مستخلصات HeLa و MCF-7)، واعلم أن الحركة الملحوظة قد تعكس حالة الفسفرة.
• قد تتطلب بروتوكولات IF/ICC و IHC-P النفاذ واسترجاع المستضد على التوالي. قم بتحسين طرق التثبيت (مثل 4% PFA مقابل الميثانول) لنوع العينة الخاص بك، وقم بتضمين خطوات الحظر لتقليل الخلفية.
• يمكن إعداد تطبيقات ELISA باستخدام تنسيقات غير مباشرة أو ساندويتش؛ قد يؤدي الاقتران بجسم مضاد التقاط مناسب إلى زيادة الحساسية. قم بمعايرة الجسم المضاد واستخدم محلول طلاء ثابت.
• تم الإبلاغ عن تفاعل متبادل مع AKT1 عند الفأر والجرذ، ولكن تحقق من تماثل التسلسل الخاص بالنوع في منطقة المستضد المناعي إذا كنت تستخدم عينات غير بشرية.

CamelBio: جسرك الشامل للمصادر

تدعم CamelBio مطوري التشخيص والباحثين بمحفظة شاملة من المواد الخام للتشخيص *In Vitro*، بما في ذلك الأجسام المضادة المُحققة لإشارات الخلايا وأبحاث السرطان. هذا الجسم المضاد متعدد النسيلة لـ AKT1 هو مثال على عروضنا التي تشمل أزواج الأجسام المضادة والبروتينات المؤتلفة والكواشف المساعدة بكميات كبيرة. بالنسبة للأهداف النادرة أو المخصصة، تقدم شبكة المصادر لدينا حلولًا مصممة خصيصًا - تواصل معنا لاستكشاف كيف يمكننا تسريع تطوير مقايسك من الفكرة إلى العيادة.