أجسام مضادة أحادية النسيلة من الأرنب ضد Acetyl-Histone H3-K27 (Q16695/P68431) لـ WB, ChIP, IF, IHC

المواصفات والمعايير الأساسية للمنتج

الخلفية البيولوجية: وظيفة وتوطين الهيستون H3 (H3.1/H3.1t)

• الهيستون H3 هو مكون أساسي للجسيم النووي (nucleosome)، وهو الوحدة المتكررة الأساسية للكروماتين. تقوم الجسيمات النووية بلف وضغط الحمض النووي (DNA)، وبالتالي تنظم الوصول إلى المادة الوراثية للنسخ، وتكرار الحمض النووي، والإصلاح، وإعادة التركيب. هذا البنية ضرورية لاستقرار الكروموسومات ووظيفة الخلية المناسبة. مراجع ذات صلة: UniProt Q16695, UniProt P68431.

• في البشر، توجد متغيرات متعددة من الهيستون H3 غير الأليلية، بما في ذلك بروتينات H3.1 الكلاسيكية المعتمدة على النسخ (المشفرة بواسطة جينات مثل H3C1، H3C2، إلخ، معرفات الجينات: 8350، 8290) ومتغير H3.1t الخاص بالخصية (المشفر بواسطة H3-4، المعروف أيضاً باسم H3FT، HIST3H3). يتم التعبير عن H3.1 الكلاسيكي في كل مكان، بينما يقتصر تعبير H3.1t على خلايا الخصية. مراجع ذات صلة: UniProt Q16695 (نوعية الأنسجة).

• يتم توطين كل من H3.1 و H3.1t في النواة ويرتبطان بالكروموسومات. تحتوي على مجال طي الهيستون (histone fold domain) يوسط دمجها في الجسيمات النووي وذيل N-terminal يبرز من الجسيم النووي، مما يوفر منصة لمجموعة متنوعة من التعديلات ما بعد الترجمة (PTMs). مراجع ذات صلة: UniProt P68431.

• يخضع ذيل الهيستون H3 الطرفي N-terminal لتعديلات ما بعد الترجمة واسعة النطاق بما في ذلك الأسيتلة، والميثلة، والفسفرة، والسيترولين، وغيرها، وتعرف مجتمعة باسم "شفرة الهيستون". تنسق هذه التعديلات ديناميكيات الكروماتين وأنماط التعبير الجيني. تعتبر أسيتلة بقايا اللايسين، مثل في الموقع 27 (K27)، علامة مميزة لمناطق الكروماتين النشطة بما في ذلك المعززات والمروجات، مما يسهل تكوين كروماتين مفتوح يعزز تنشيط الجينات. مراجع ذات صلة: UniProt P68431 (نظرة عامة على PTM).

• تم إنتاج الجسم المضاد الموصوف هنا ضد ببتيد مركب يتوافق مع اللايسين 27 الأسيتيلي من الهيستون H3 البشري (أيزوفرم H3.1، NP_003520.1). يتعرف بشكل خاص على الشكل الأسيتيلي ومناسب للكشف عن هذا التعديل في مجموعة متنوعة من التطبيقات.

التوجيه التجريبي ونصائح تقنية

• تم إنشاء هذا الجسم المضاد باستخدام مستضد ببتيد مركب أسيتيلي؛ ضع في الاعتبار أنه قد يتعرف على العصبة (epitope) في كل من التكوينات الخطية (المفككة) والأصلية، مما يجعله مناسباً للتطبيقات مثل التلطيخ المناعي الغربي (Western blot - WB)، والترسيب المناعي، والمقايسات القائمة على الكروماتين.
• بالنسبة لـ WB، الوزن الجزيئي المتوقع للهيستون H3 هو ~15 kDa. ومع ذلك، قد تهاجر الهيستونات بشكل غير طبيعي اعتماداً على ظروف الهلام؛ قم بتضمين ضوابط إيجابية مناسبة (مثلاً، مستخلص خلايا HeLa الكامل) وعلامات الوزن الجزيئي.
• في تطبيقات ترسيب مناعي للكروماتين (ChIP) و CUT&Tag، قم بتأكيد خصوصية وكفاءة الجسم المضاد من خلال إجراء مقايسات منافسة الببتيدات وتضمين مواقع الهدف المعروفة (مثلاً، المعززات النشطة المميزة بـ H3K27ac) كضوابط إيجابية.
• نظراً للتفاعل المتقاطع المتوقع الواسع (الإنسان، الفأر، الجرذ، وغيرها)، قد يكون هذا الجسم المضاد مناسباً لمختلف الأنواع، ولكن يوصى بالتحقق من الصحة في نظام العينة المحدد.
• بالنسبة للمناعة بالفلورسنت (IF/ICC) والمناعة النسيجية (IHC-P)، قد تتأثر إمكانية الوصول إلى العصبة (epitope) ببروتوكولات التثبيت والنفاذية؛ يُنصح بتحسين هذه الخطوات.
• يمكن تقييم أداء الجسم المضاد في ELISA والتلطيخ النقطي (DB) باستخدام الببتيدات الأسيتيلية مقابل غير الأسيتيلية لتقييم الخصوصية.

CamelBio: جسر التوريد الشامل الخاص بك

CamelBio هي شريك مخصص لتوريد المواد الخام لتشخيص المختبر (IVD)، وتوفر لمصنعي الأجهزة التشخيصية، والمختبرات، ومعاهد البحث وصولاً سلساً إلى محفظة شاملة من الأجسام المضادة، والمستضدات، والمواد الكيميائية المساعدة. في مجال أبحاث علم الوراثة التخلقي وتعديل الهيستون، تقدم CamelBio أجساماً مضادة خاصة بالأسيتلة تم التحقق منها، وأزواجاً محسنة من الأجسام المضادة أحادية ومتعددة النسيلة، ومواد كيميائية مساعدة بالجملة لدعم احتياجات تطوير المقايسات الخاصة بك. من التوريد الروتيني إلى شراء المواد الخام للأهداف النادرة، تمكن منصتنا مشروعك من المفهوم إلى العيادة من خلال سلسلة توريد مبسطة وموثوقة.