جسم مضاد وحيد النسيلة أرنب لأستيل هيستون H3-K18 (Q16695/P68431) | تم التحقق من صحته لـ WB و IHC و ChIP و ELISA

المواصفات والمعايير الأساسية للمنتج

الخلفية البيولوجية: وظيفة هيستون H3 وموقعه الخلوي

• هيستون H3 هو بروتين نوكليوسومي أساسي يلف الحمض النووي ويضغطه ليشكل الكروماتين، مما يحد من إمكانية وصول الآليات المعتمدة على الحمض النووي ويلعب دورًا مركزيًا في تنظيم النسخ الجيني وإصلاح الحمض النووي وتكرار الحمض النووي وثبات الكروموسومات. مراجع ذات صلة: UniProtKB Q16695, UniProtKB P68431

• يقع هذا البروتين في النواة ويرتبط بالكروموسومات. مراجع ذات صلة: UniProtKB Q16695, UniProtKB P68431

• النوع الأصلي H3.1 مشفر بواسطة جينات متعددة (مثل H3C1 و H3C2) ويُعبّر عنه بطريقة تعتمد على تكرار الحمض النووي في الخلايا الجسدية. أما النوع البديل H3.1t (Q16695) فيُعبّر عنه على وجه الخصوص في خلايا الخصية. مراجع ذات صلة: UniProtKB Q16695

• يخضع هيستون H3 لتعديلات مكثفة ما بعد الترجمة تشكل ما يسمى "كود الهيستون". يعتبر الأسيتيل عند الموقع K18 (الموقع 19 في تسلسل H3 الأصلي) علامة رئيسية مرتبطة بتنشيط النسخ الجيني وإصلاح الحمض النووي. يتم تنظيم هذا التعديل ديناميكيًا بواسطة إنزيمات HAT و HDAC. وقد تم توثيق الأسيتيل عند هذا الموقع في دراسات متعددة. مراجع ذات صلة: PMID:19608861, PMID:16267050, PMID:16627869, PMID:17194708, PMID:35939806

إرشادات تجريبية ونصائح تقنية

• المستضد المناعي هو ببتيد أسيتيل اصطناعي حول الموقع K18 لهيستون H3 البشري. من المتوقع أن يتعرف الجسم المضاد الأرنبي الوحيد النسيل الناتج على الموقع الأسيتيل H3K18 على وجه الخصوص، دون تفاعل متصالب مع الموقع K18 غير الأسيتيل أو مواقع الأسيتيل الأخرى. تحقق من الخصوصية باستخدام فحوصات التنافس مع الببتيدات الأسيتيلية وغير الأسيتيلية، أو عن طريق معالجة الخلايا بمثبطات HDAC.
• في النشاف الغربي (WB)، من المتوقع ظهور نطاق واحد عند كتلة حوالي 16 كيلو دالتون. استخدم ضوابط تحميل مناسبة (مثل هيستون H3 الكلي أو أجسام مضادة للنهاية C من H3) لتعديل مستويات الأسيتيل. يمكن تعزيز إشارات الأسيتيل عن طريق معالجة الخلايا بمثبطات نازعة الأسيتيل مثل تريكوستاتين A (TSA) أو بوتيرات الصوديوم.
• في الكيمياء المناعية المناعية (IHC-P) والمناعة الفلورية (IF/ICC)، قم بتحسين ظروف استرجاع المستضد ونفاذية الغشاء. يوصى بإخماد البيروكسيداز الداخلي في IHC-P. تحقق من صحة التلوين عن طريق المقارنة مع ضوابط النمط النسيلي.
• في ترسيب الكروماتين المناعي (ChIP)، تأكد من تحسين ظروف الارتباط المتقاطع لتعديلات الهيستون. استخدم مواضع ضابطة إيجابية وسلبية مناسبة (مثل الجينات المنسخة نشطًا مقابل المواضع المكتومة). يمكن التحقق من كفاءة التخصيب عن طريق تفاعل البوليميراز المتسلسل الكمي qPCR.
• نظرًا للتفاعل المتصالب الواسع المتوقع (مع الإنسان والفأر والجرذ وأنواع أخرى)، أكد التفاعل في النوع الذي تهتم به قبل البدء بالتجارب واسعة النطاق. يُظهر محاذاة التسلسل أن المنطقة المحيطة بـ K18 محافظة للغاية عبر الفقاريات.
• في تطبيقات ELISA والنقش البقعي (DB)، يمكن استخدام الجسم المضاد للكشف عن ببتيدات H3K18 الأسيتيلية أو الهيستونات المؤتلفة. فكر في استخدام جسم مضاد ثانوي موسوم بالبيوتين وستربتافيدين المترافق بـ HRP لتضخيم الإشارة.

CamelBio: جسرك الشامل للمصادر

CamelBio هو مورد رائد شامل للمواد الخام التشخيصية في المختبر، يدعم مصنعي التشخيص والمختابر البحثية والمعاهد من مرحلة الفكرة وحتى التطبيق السريري. نقدم محفظة شاملة من أزواج الأجسام المضادة التي تم التحقق من صحتها، والأجسام المضادة وحيدة النسيلة ومتعددة النسائل المحسنة، والكواشف المساعدة بكميات كبيرة، وخدمات الحصول على الأهداف النادرة المتخصصة. لتلبية احتياجات أبحاث علم التخلق والكروماتين الخاصة بك، بما في ذلك أجسام مضادة الهيستون الأسيتيلية مثل هذا الجسم المضاد الأرنبي وحيد النسيلة ضد أستيل هيستون H3-K18، توفر CamelBio عملية شراء موثوقة ودعمًا مخصصًا لتسريع تطوير الفحوصات لديك واكتشاف المؤشرات الحيوية.