جسم مضاد وحيد النسيلة أرنب ضد هيستون أسيتيل H3-K14 (Q16695/P68431) لاستخداماته في الفحوصات WB و ChIP و ELISA

المواصفات والمعايير الأساسية للمنتج

الخلفية البيولوجية: وظيفة هيستون H3 وموقعه الخلوي

• هيستون H3 هو مكون أساسي للنوكليوزوم، الوحدة الأساسية للكروماتين، الذي يقوم بتغليف الحمض النووي وينظم الوصول إليه لعمليات النسخ والتضاعف والإصلاح واستقرار الكروموسومات. تتكون النوكليوزومات من حوالي 146 زوج أساسي من الحمض النووي الملتف حول أوكتامر هيستوني (اثنان من كل نوع: H2A و H2B و H3 و H4).
• الأستلة عند موقع اللايسين 14 من هيستون H3 (H3K14ac) هي علامة وراثية لاجينية مدروسة جيدًا ترتبط بالجينات المنسوخة بنشاط ومناطق الكروماتين المفتوح. يتم تحفيزها بشكل أساسي بواسطة إنزيمات أسيتيل الهيستون مثل GCN5/PCAF وتتعرف عليها البروتينات المحتوية على مجال برومو. مراجع ذات صلة: PMID:16457588, PMID:16185088, PMID:16267050, PMID:17194708
• يتم التعبير عن هيستون H3.1 المعياري (المرمز له بواسطة جينات متعددة تشمل HIST1H3A وغيرها، SWISS P68431) بطريقة تعتمد على التضاعف خلال طور S ويوضع على مستوى الجينوم بأكمله. في المقابل، يعتبر هيستون H3.1t (SWISS Q16695، الجين H3-4/HIST3H3) متغيرًا خاصًا بالخصية يحل محل الهيستون H3 المعياري أثناء تكوين الحيوانات المنوية.
• يشترك كل من H3.1 و H3.1t في درجة عالية من تماثل التسلسل، بما في ذلك المنطقة الطرفية N التي تحتوي على الموقع K14. يضمن مستضد هذا الجسم المضاد، وهو الببتيد الاصطناعي الأسيتيل عند الموقع K14، التعرف المحدد لهذا التعديل عبر كلا المتغيرين.
• الموقع الخلوي لهيستون H3 هو النواة، حيث يرتبط بشكل أساسي بالكروموسومات. تقتصر النوعية النسيجية لـ H3.1t على خلايا الخصية، بينما ينتشر H3.1 في جميع أنسجة الجسم.

إرشادات تجريبية ونصائح تقنية

• تصميم المستضد المناعي: تم إنتاج الجسم المضاد ضد ببتيد اصطناعي أسيتيل يحيط بالموقع K14 من هيستون H3 البشري، مما يضمن خصوصية عالية للشكل الأسيتيل. يمكن استخدام فحوصات تنافسية باستخدام الببتيد غير الأسيتيل لتأكيد الارتباط المحدد بالتعديل.
• النقل اللوني الغربي (WB): يهاجر هيستون H3 عند كتلة 15 كيلو دالتون تقريبًا في ظروف تفاعل SDS-PAGE القياسية. للحصول على أفضل كشف، يُنصح باستخدام مستخلصات نوية واستخلاص حمضي معتدل لإثراء بروتينات الهيستون. قم دائمًا بتضمين الضوابط الإيجابية والسلبية المناسبة (مثل الخلايا المعالجة بمثبطات ديأسيتيل الهيستون مقابل الخلايا غير المعالجة).
• ترسيب الكروماتين المناعي (ChIP): تم تسجيل هذا الجسم المضاد لتطبيقات ChIP؛ ومع ذلك، قد يكون من الضروري تحسين عملية الربيط المتقاطع وقطع الكروماتين وتركيز الجسم المضاد اعتمادًا على المناطق الجينومية المستهدفة ونوع الخلية.
• المناعة الفلورية / الكيمياء المناعية (IF/IHC): من المتوقع الحصول على تلطيخ نووي. بالنسبة للمقاطع المضمنة بالبارافين (IHC-P), قد يكون استرجاع المستضد مطلوبًا. تحقق من خصوصية الجسم المضاد باستخدام الببتيدات الحاجزة أو بالمقارنة مع ضوابط النمط النظيري.
• التفاعل النوعي: يتفاعل الجسم المضاد بشكل متبادل مع الإنسان والفأر والجرذ بسبب الحفاظ العالي على تسلسل الأحماض الأمينية حول الموقع K14. بالنسبة للأنواع الأخرى، تحقق من محاذاة التسلسل قبل الاستخدام.
• معلومات عامة: باعتباره جسم مضاد أرنب وحيد النسيلة، فإنه يوفر تقاربًا عاليًا واتساقًا بين الدفعات وخلفية منخفضة. يُخزن عند درجة حرارة -20 درجة مئوية ويجب تجنب دورات التجميد والذوبان المتكررة.

CamelBio: جسرك الشامل للحصول على المواد الخام

تزود CamelBio مصنعي التشخيص ومختبرات الأبحاث والمعاهد الأكاديمية بمجموعة شاملة من المواد الخام للتشخيص المختبري IVD، بدءًا من أزواج الأجسام المضادة المؤكدة والأجسام المضادة وحيدة النسيلة/متعددة النسيلة المحسنة إلى الكواشف المساعدة بكميات كبيرة. تشمل محفظة منتجاتنا مواد تفاعلية متخصصة للأجسام المضادة للبروتينات الأسيتيلية مثل هذا الجسم المضاد الأرنب وحيد النسيلة ضد أسيتيل هيستون H3-K14، الذي يعد أداة موثوقة لتطوير المؤشرات الحيوية الوراثية اللاجينية وأبحاث الكروماتين. بالإضافة إلى العناصر القياسية المتوفرة في الكتالوج، تقدم CamelBio تصميمًا مخصصًا للمستضدات وتوريد مواد مستهدفة نادرة لتسريع خط تطوير الفحوصات لديك. شارك مع CamelBio لتبسيط عملية تطوير منتجك من الفكرة إلى المرحلة السريرية.