الأجسام المضادة الأرنبية متعددة النسيلة المضادة لـ Acetyl-DNMT1 (K1127/K1129/K1131/K1133) (P26358) للاستخدام في IHC-P، IF/ICC، ELISA

المواصفات والمعايير الأساسية للمنتج

الخلفية البيولوجية: وظيفة وتوطين DNA (cytosine-5)-methyltransferase 1

إنزيم DNMT1 هو ميثيل ترانسفيراز حاسم للحمض النووي مسؤول عن الحفاظ على أنماط ميثلة CpG أثناء تضاعف الحمض النووي، مما يضمن وراثة التعديلات اللاجينية. يقوم بشكل تفضيلي بميثلة الحمض النووي شبه المُمَثْل ويرتبط ببؤر التضاعف في الطور S، ولكنه يعمل أيضًا بشكل مستقل عن التضاعف خلال الطورين G2 و M للحفاظ على المشهد العام للميثلة. يتضمن التكتم بوساطة DNMT1 تفاعلاً مباشرًا مع HDAC2 وتشكيل معقدات مثبطة تنظم تعديلات الهستون والتعبير الجيني. مراجع ذات صلة: PMID:17200670, PMID:18754681, PMID:21745816, PMID:26070743, PMID:10888872, PMID:24623306

يتوطن الإنزيم بشكل رئيسي في النواة ويتم تجنيده إلى الكروماتين في بؤر التضاعف عبر مجال RFTS الخاص به، الذي يتعرف على الهستون H3 المُستبدل باليوبيكويتين. كما يتوطن في المناطق المحيطة بالنوية، مما يعكس وظائف متخصصة في الحفاظ على الكروماتين المغاير. مراجع ذات صلة: PMID:12145218, PMID:24492612, PMID:29053958

يتم التعبير عن DNMT1 بشكل واسع، مع مستويات عالية بشكل خاص في الأنسجة الجنينية، القلب، الكلى، المشيمة، وخلايا الدم أحادية النواة المحيطية، وتعبير أقل في الطحال، الرئة، الدماغ، الأمعاء الدقيقة، القولون، الكبد، والعضلات الهيكلية. مراجع ذات صلة: PMID:10325416

تلعب التعديلات ما بعد الترجمة لـ DNMT1، وخاصة الاستلة، أدوارًا تنظيمية رئيسية. تتوافق مجموعة اللايسين التي يستهدفها هذا الجسم المضاد (K1127/K1129/K1131/K1133 في النظير 1) مع مواقع استلة معروفة (K1111/K1113/K1115/K1117/K1119/K1121 في التسلسل الأساسي) التي يتم تعديلها بواسطة هيستون أسيتيل ترانسفيرازات ويمكن أن تؤثر على استقرار البروتين، وتوطينه، وتفاعله مع عوامل أخرى في علم التخلق. مراجع ذات صلة: PMID:21947282, PMID:19608861

إرشادات ونصائح تقنية للتجارب

• تم إنتاج هذا الجسم المضاد الأرنبي متعدد النسيلة ضد ببتيد اصطناعي مُستل يشمل K1127، K1129، K1131، و K1133 من DNMT1 البشري. من المتوقع أن يتعرف بشكل محدد على الشكل المُستل من البروتين.
• للتطبيق في IHC-P، قد تكون هناك حاجة إلى طرق استرجاع مستضد قياسية (مثل استرجاع الحاتمة المحفز بالحرارة في محلول سترات، درجة حموضة 6.0) لكشف الحاتمة. يجب تحديد تخفيف الجسم المضاد الأمثل وظروف الحضانة تجريبياً.
• عند إجراء IF/ICC، يُستخدم التثبيت بـ 4% بارافورمالدهيد يليه النفاذية باستخدام 0.1% تريتون X-100 بشكل شائع؛ ومع ذلك، يجب التحقق من صحة هذه الخطوات في النظام الخلوي أو النسيجي المحدد.
• يمكن استخدام ELISA للكشف عن مستويات DNMT1 المُستلة وقياسها في مستخلصات الخلايا أو الأنسجة. ضع في اعتبارك استخدام اختبار تنافس الببتيد لتأكيد خصوصية الارتباط.
• نظرًا لأن DNMT1 يُعبَّر عنه على نطاق واسع، قم بتضمين ضوابط إيجابية وسلبية مناسبة (مثل الأنسجة أو خطوط الخلايا ذات حالة الاستلة المعروفة) للتحقق من أنماط التلوين.
• الوزن الجزيئي المتوقع هو 183 كيلو دالتون؛ إذا تم إعادة استخدام الجسم المضاد لتطبيقات غير مُتحقق منها (مثل ويسترن بلوت)، قم بالتحقق من حجم الحزمة وخصوصيتها وفقًا لذلك.

CamelBio: جسر التوريد الشامل الخاص بك

توفر CamelBio لمصنعي التشخيص والمختبرات ومعاهد البحث وصولاً شاملاً إلى المواد الخام للتشخيص المخبري، والخدمات الفنية، والاستشارات – تغطي كل مرحلة من المفهوم إلى العيادة. كشريك في دفع عجلة البحث في علم التخلق وتطوير التشخيص، نقدم أزواج أجسام مضادة مُتحقق منها، وأجسام مضادة أحادية النسيلة ومتعددة النسيلة مُحسنة (بما في ذلك الكواشف الخاصة بالاستلة مثل هذا الجسم المضاد المضاد لـ acetyl-DNMT1 pAb)، وكميات كبيرة من الكواشف المساعدة، وتوريد مخصص للأهداف النادرة. تضمن خبرتنا في سلسلة التوريد حصولك على مواد خام عالية الجودة ومتسقة لتسريع سير عمل التشخيص والبحث الخاص بك.